大豆磷脂氮含量磷含量测定方法与注意事项.doc

大豆磷脂磷含量测定 状态：黄色或黄棕色半固体，吸湿性强。 标准规定：以无水物计算，本品含磷（P）不得少于2.7%。 检验过程： 对照品溶液的制备：精密称取经105℃干燥至恒重的磷酸二氢钾对照品43.9mg，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置另一50ml量瓶中，加水稀释至 刻度，摇匀（每1ml相当于0.04mg P）。 供试品溶液的制备：取本品约0.15g，精密称定，置凯氏烧瓶中，加硫酸20ml与硝酸50ml,缓缓加热至溶液呈淡黄色，小心滴加过氧化氢溶液，使溶液褪色，继续加热30分钟，冷却后，用水定量转移至100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。 测定法：精密量取对照品溶液与供试品溶液各2ml，分别置50ml量瓶中，各依次加入钼酸铵硫酸试液4ml，亚硫酸钠试液2ml与新鲜配制的对苯二酚溶液（取对苯二酚0.5g，加水适量使溶解，加硫酸1滴，用水稀释至100ml）2ml，加水稀释至刻度，摇匀，暗处放置40分钟，照紫外-可见分光光度法（《中国药典》2010年版二部附录Ⅳ A），在620nm的波长处分别测定吸光度，计算含磷量。 钼酸铵硫酸试液：1.25g钼酸铵，加硫酸7.5ml，用水稀释到50ml（可保存2周） 对苯二酚溶液：取对苯二酚0.25g，加水适量使溶解，加硫酸1滴，用水稀释至50ml（现配） 亚硫酸钠试液：2g无水亚硫酸钠用水稀释到10ml（现配） 计算： 含量＝ Ａ供试品×M对照品×P/KH2Po4×稀释倍数×对照品含量 ×100％ Ａ对照品×M供试品×（1-干燥失重%） 式中： Ａ供试品 ── 供试品溶液吸收度； 　　　 Ａ对照品 ── 对照品溶液吸收度； M供试品 ── 供试品重量(g)； M对照品 ── 对照品重量(g)； P ── 磷的原子量(30.97)； KH2Po4 ── 磷酸二氢钾分子量(136.09)； 公式推导：基本原理A=ECL A供 = EC供磷L = m供磷/V = m供磷 A对 EC对磷L m对磷/V m对磷 A供 = A对 M供*（1-干燥失重%）*含量*(2/100) M对*对照品含量*（10/50）*（2/50）*(P/KH2PO3) 含量＝ Ａ供×M对×P/KH2Po4×（10/50）×（2/50）×对照品含量 ×100％ Ａ对×M供×（1-干燥失重%）×（2/100） 含量＝ Ａ供×M对×P/KH2Po4×对照品含量×0.4 ×100％ Ａ对×M供×（1-干燥失重%） 注意事项： 1.不加石棉网可快些，要逐渐调大火，防止酸液损伤电炉丝和溶液沸腾过于剧烈。 2.溶液有时会变黑渐渐沸腾，最后硝酸挥发约剩20ml硫酸，显淡黄或白色，约烧6小时。 3.最后加过氧化氢约1~3滴管即能透明。 那英杰 406293109 大豆磷脂氮含量测定 检验方法：取本品约0.1g，精密称定，照氮测定法（《中国药典》2010年版二部附录Ⅶ D 第二法）测定。 标准规定：本品含氮量应为1.5～2.0%。 第二法（半微量法） 连接蒸馏装置（药典），A瓶中加水适量与甲基红指示液数滴，加稀硫酸使成 酸性，加玻璃珠或沸石数粒，从D漏斗加水约50ml，关闭G夹，开放冷凝水， 煮沸A瓶中的水,当蒸气从冷凝管尖端冷凝而出时，移去火源，关H夹，使C 瓶中的水反抽到B瓶，开G夹,放出B瓶中的水，关B瓶及G夹，将冷凝管尖端 插入约50ml水中，使水自冷凝管尖端反抽至C瓶，再抽至B瓶，如上法放去。 如此将仪器洗涤2～3次。 取供试品适量（约相当于含氮量1.0～2.0mg），精密称定，置干燥的 30～50ml凯氏烧瓶中，加硫酸钾（或无水硫酸钠）0.3g与30％硫酸铜溶液5滴， 再沿瓶壁滴加硫酸2.0ml；在凯氏烧瓶口放一小漏斗，并使烧瓶成45°斜置， 用小火缓缓加热使溶液保持在沸点以下，等泡沸停止，逐步加大火力，沸 腾至溶液成澄明的绿色后，除另有规定外，继续加热10分钟，放冷，加水 2ml。 取2％硼酸溶液10ml，置100ml锥形瓶中，加甲基红－溴甲酚绿混合指示 液5滴，将冷凝管尖端插入液面下。然后，将凯氏烧瓶中内容物经由D漏斗 转入C蒸馏瓶中，用水少量淋洗凯氏烧瓶及漏斗数次，再加入40％氢氧化 钠溶液10ml，用少量水再洗漏斗数次，关G夹，加热A瓶进行蒸气蒸馏，至 硼酸液开始由酒红色变为蓝绿色时起，继续蒸馏约10分钟后，将冷凝管尖 端提出液面，使蒸气继续冲洗约1分钟，用水淋洗尖端后停止蒸馏。 馏出液用硫酸滴定液（0.005mol/L）滴定至溶液由蓝绿色变为灰紫色， 并将滴定的结果用空白试验（空白和供试品所得馏出液的容积应基本相同，约70～75ml）校正。 每1ml硫酸滴定液（0.005mo