复方归芍胶囊质量标准研究.docx

复方归芍胶囊质量标准研究李养学，谭志灿，李素梅，江洁怡 复方归芍胶囊质量标准研究 李养学，谭志灿，李素梅，江洁怡 (广东省中医研究所，广东广州510095) 【摘要】 目的：建立复方归芍胶囊的质量标准。方法：采用薄层色谱法(TLC)对复方归芍胶囊中当归、白 芍、黄芪和柴胡进行定性鉴别；采用高效液相色谱法(}lPLc)测定处方中阿魏酸的含量。以Agilent Extend c。。(4．6X250m，5 uⅢ)柱为色谱柱：柱温为35C；以甲醇-1％醋酸溶液为流动相，梯度洗脱；流速为I．Oml／min； 检测波长为316nm。结果：当归、白芍、黄芪和柴胡的TLC特征斑点清晰，分离度好，阴性对照无干扰；阿 魏酸在25．06～150．36ng范围内线性关系良好，其回归方程为：Y=6．3353X一6．6305，相关系数r=O．99999。 加样回收率为98．46％，RSD为1．85％(n=9)。结论：本方法可靠、准确、重现性好，可作为复方归芍胶囊的 质量控制方法。 【关键词】 复方归芍胶囊：质量标准；薄层色谱法；高效液相色谱法；阿魏酸 复方归芍胶囊是广东省第二中医院医院制剂，由当归、白芍、黄芪、白术、 柴胡、延胡索、阿胶、茯苓等药物组成，具有气血双补、调经止痛、健脾利湿的 功效，在临床上用于治疗气血不足、脾不统血之月经不调、痛经等症。为了更好 地控制其内在质量，保证临床疗效，本文采用薄层色谱法对方中当归、白芍、黄 芪和柴胡进行了定性鉴别，采用高效液相色谱法对方中阿魏酸的含量进行了测 J。’ ^匕o 1仪器与试药 1．1仪器：Agilent 1200高效液相色谱仪(美国)；Camag Automatic TLC Sampler 4全自动薄层点样仪(瑞士)；Camag Reprostar 3薄层成像系统(瑞士)； KQ5200DE型数控超声波清洗器(昆山)；PBQ-II型薄层自动铺板器(重庆)：DHG 一9070A电热恒温干燥箱(上海)；Sartorius BP21 1D分析天平(德国)；HWS-26电 热恒温水浴锅(上海)。 1．2试药：当归对照药材(批号：120927—201014)、白芍对照药材(批号： 120905—200508)、黄芪对照药材(批号：120974-200508)、柴胡对照药材(批 号：120992—200504)、阿魏酸对照品(批号：110773-200611)均购于中国药品 生物制品检定所；复方归芍胶囊(批号：120801、120802、120803)由广东省第二 中医院制剂室提供；乙腈为色谱纯，水为双蒸水；其余均为分析纯。 2定性鉴别n叫 2．1当归TLC鉴别取本品内容物59，加1％碳酸氢钠溶液50ml，超声处理 20分钟，离心，取上清液，用稀盐酸调节pH值至2～3，用乙醚振摇提取2次， 每次20ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另 取当归对照药材29，同法制成对照药材溶液。再取缺当归的阴性样品59，同供 试品溶液制备方法制成当归阴性对照溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年 取当归对照药材29，同法制成对照药材溶液。再取缺当归的阴性样品59，同供 试品溶液制备方法制成当归阴性对照溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年 版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各10 u l，分别点于同一硅胶G薄层 板上，以环己烷三氯甲烷一乙酸乙酯一甲酸(4：l：1：0．1)为展开剂，展开，取出， 晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位 置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。(见图1) 2．2白芍TLC鉴别取本品内容物59，加乙醇50ml，超声处理30分钟，滤 过，滤液蒸干，残渣加水5ml，微热使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂 柱(内径为1．5cm，柱高为12cm)，以水50ml洗脱，弃去水液，再用20％乙醇50ml 洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取白芍 对照药材0．59，加乙醇10ml，超声处理5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇 lml使溶解，作为对照药材溶液。再取缺白芍的阴性样品59，同供试品溶液制备 方法制成白芍阴性对照溶液。照薄层色谱法(附录ⅥB)试验，吸取上述三种溶液 各10N，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷一乙酸乙酯一甲醇一甲酸 (40：5：10：0．2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相 同颜色的斑点，阴性对照无干扰。(见图2) 2．3黄芪TLC鉴别取本品内容物109，加水50ml，加热回流30分钟，滤 过，滤液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨试