第五章 遗传与变异.ppt

* * * * * * * * * * * 1) 产生充分的体液免疫 2) 不出现突变和复毒 3) 可用于免疫缺陷的病人 4) 一般在热带地区活性不受影响 5) 便于保存与运输 Advantages of inactivated vaccine 7、inactivated Vaccines * 1) 许多接种者不产生免疫反应 2) 需要多次免疫 3) 无局部免疫 4) 成本高 5) 猴子短缺 6) 灭活失败，接种病毒的毒株 Disadvantages of inactivated vaccines * 第五节 病毒基因图的构建方法 一、遗传学方法 二、分子生物学方法 * 一、遗传学方法 1、重组作图（recombination mapping） 2、重配作图（reassortant mapping） 3、中间型杂交（intertype cross） * 1、重组作图 基本原理：当两株带有不同标记的病毒突变体感染同一细胞培养物时，其标记基因的位置越接近，突变体经过交换产生的病毒重组体频率越低。 在单一分子病毒基因组中，重组通过断裂与重接机制或拷贝选择机制进行，两个突变体间的重组频率与其在染色体上的物理距离成比例。 在具分段基因组的病毒中，当突变体成对杂交时，子代重组率要么非常高，要么检测不到，呈现一种有或无的类型。 * 2、重配作图 3、中间型杂交 遗传学研究中经常用一个病毒的不同血清型或株系作为杂交的样本，血清型和株系比突变体提供了更多的遗传标记。 核酸的电泳迁移率经常作为血清型或株系的遗传学标记。在分段基因组病毒中，病毒基因组片段迁移率的多型性也可作为亲代的遗传学标记。 * 4、重组作图—噬菌体的重组测验 1）对性状的理解（噬菌斑？） 噬菌斑形态突变型：r—r＋型 清晰、大噬菌斑—浑浊、小噬菌斑 宿主范围突变型：h—h＋型 (侵染、侵染后均可) 交换是发生在DNA分子间 * 2）T4噬菌体野生型和几种突变型的区别 噬菌体类型 不同大肠杆菌菌斑平板 E.coli B E. coli K(?) E. coli S 野生型 小噬菌斑 小噬菌斑 小噬菌斑 rI 大噬菌斑 大噬菌斑 大噬菌斑 rII 大噬菌斑 无噬菌斑（致死） 小噬菌斑 rIII 大噬菌斑 小噬菌斑 小噬菌斑 rII: r47 +, + r104 (++, r47r104, r47+, +r104) * 3）T4噬菌体共侵染 = = = = = = = = = = = = = = = = E.coli B r47 + + r104 E.coli B E. coli K(?) 野生型 小噬菌斑 小噬菌斑 rII 大噬菌斑 无噬菌斑（致死） rII: r47 +, + r104 ( + +, r47 r104, r47 +, + r104 ) E.coli B 3456 E.coli K(?) 45 * 4）T4噬菌体突变型的重组测验 Benzer的重组测验与基因的精细结构分析 噬菌体杂交实验 r47r+ × r+r104 B B K(?) r+r+ 亲组合：r47r+、r+r104 重组合：r+r+、r47r104 * 重组值的计算 ?100% 重组率＝ 重组型噬菌斑数 总噬菌斑数 ＝ [ E. coli(?) 45 ] ? 2 [ E.coli B 3456 ] ?100% ＝ 1.33% * * 5）利用这种方法测得最小重组率的意义 测得最小重组值=0.02% =0.02cM T4噬菌体图距=1500cM (遗传重组测得) T4噬菌体1.8 ? 105bp(生物化学及分子生物学测得) 重组作图的精度： 0.02cM=2