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微生物的遗传变异和育种
1.基本概念
①遗传型/基因型:指个体所含有的全部遗传因子即基因组
②表型:一切外表特征和内部特征的总和
遗传型(可能性)+ 环境条件→表型(现实性)
③变异:遗传型的改变
【变异的特点:变异率低
性状变化幅度大
新性状稳定遗传】
④饰变:不涉及遗传物质结构变化,在转录和翻译水平上的表型变化
2.微生物是遗传学研究中最好的材料
①微生物细胞结构简单,营养体一般为单倍体,方便建立纯系
②很多常见微生物都易于人工培养,快速,大量生长繁殖
③对环境因素的作用敏感,易于获得各类突变株,操作性强
一、生物遗传信息的载体
(一)3个经典实验:证明了核酸尤其是DNA才是生物遗传变异的真正物质基础
经典转化实验
1F.Griffith
研究对象:肺炎双球菌
S型菌株:有荚膜,菌落表面光滑,有致病性
R型菌株:无荚膜,菌落表面粗糙,无致病性
1928年,Griffith进行了以下几组实验: 对小鼠注射活R或死S菌———————小鼠存活 对小鼠注射活S菌———————————小鼠死亡 对小鼠注射活R菌和加热杀死S菌 ———小鼠死亡(从死亡小鼠体内提取到活的S菌)
21944年O.T.Avery、C.M.MacLeod和M
McCarty从热死S型S. pneumoniae中提纯了可能作为转化因子的各种成分
并在离体条件下进行了转化试验:
A、只有S型细菌的DNA才能将肺炎
双球菌的R型转化为S型
B、DNA纯度越高,转化效率也越高
C、说明S型菌株转移给R型菌株的,
是遗传因子
2.噬菌体感染实验
A. D. Hershey和M. Chase,1952年
含32P-DNA的一组:放射性85%在沉淀中
B、含35S-蛋白质的一组:放射性75%在上清液中
3.植物病毒的重建实验
上述结果说明,在RNA病毒中,遗传的物质基础也是核酸
遗传物质在细胞内的存在部位和方式
①细胞水平:存在于细胞核或核质体,单核或多核
②细胞核水平:原与真核生物的细胞核结构不同,
有无核膜、形态是否固定、是否与蛋白质结合
③染色体水平:真核通常有较多染色体,原核环状
染色体
④核酸水平:绝大多数DNA,少数病毒RNA,DNA
多双链,少单链
⑤基因水平:具自主复制能力的遗传功能单位
⑥密码子水平:信息单位,起始和终止
⑦核苷酸水平:突变或交换单位,四种碱基
⑧原核生物的质粒:是一类小型闭合环状核外双螺旋DNA分子,能独立于细胞核进行自主复制
几种代表性质粒:F因子/致育因子/性因子、R因子/抗性因子、产细菌素的质粒、毒性质粒、
代谢质粒、隐秘质粒
基因突变和诱变育种
(一)基因突变的类型
1.依表型的改变分为:
①营养缺陷型:因突变而丧失产生某种生物合成酶的能力,并因而成为必须在培养基中添加
某种物质才能生长的突变类型
②抗性突变型:因突变而产生了对某种化学药物或致死物理因子的抗性
③条件致死突变型:突变后在某种条件下可正常生长繁殖,而在另一条件下却无法生长繁殖
的突变型
④抗原突变型:因突变而引起的抗原结构发生改变
⑤产量突变型
⑥形态突变型
2.按是否比较容易、迅速地分离到发生突变的细胞来分:
①选择性突变株:具有选择标记(如营养缺陷性、抗性突变型、条件致死突变型),只要选
择适当的环境条件,如培养基、温度、pH值等,就比较容易检出分离到
②非选择性突变株:无选择标记(如产量突变型、抗原突变型、形态突变型),能鉴别这种
突变体的惟一方法是检查大量菌落并找出差异
(二)突变率
1.定义:某一细胞(或病毒体)在每一世代中发生某一性状突变的几率
也可以通过某一单位群体在每一世代中发生突变株的数目表示
特点:①变率较低 ②某一基因的突变一般是独立发生的
(三)突变的特点
适用于整个生物界,以细菌的抗药性为例
①不对应性:突变的性状与引起该突变原因之间无直接的对应关系
②自发性:突变可以在没有人为诱变因素处理下自发地产生
③稀有性:突变率低且稳定
④独立性:各种突变独立发生,不会互相影响
⑤可诱发性:诱变剂可提高突变率
⑥稳定性:变异性状稳定可遗传
⑦可逆性:从原始的野生型基因到变异株的突变称为正向突变,从突变株回到野生型的过程
则称为回复突变或回变
(四)基因突变自发性和不对应性的实验证明
1.变量实验
变量试验又称波动试验或彷徨试验
1943年,S. E. Luria 和M. Delbrück 根据统计学原理设计
涂布实验
原理与变量试
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