绿叶中有关色素的提取以及分离的实验-杨琪.docVIP

实验：绿叶中色素的提取和分离 杨琪 一．实验原理 实验中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇(丙酮，汽油，苯等)中，所以，可以用无水乙醇提取绿叶中的色素。 绿叶中的色素不止一种，他们都能溶解在层析液中。然而，它们在层析液中的溶解度不同；溶解度高的随层析液在滤纸上扩散的快；反之则慢。这样，几分钟之后绿叶中的色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而分离开。且溶解度最高的是胡萝卜素，它随层析液在滤纸上扩散的最快；叶黄素和叶绿素a的溶解度次之，叶绿素b的溶解度最低，扩散的最慢。 二．实验目的 1. 掌握提取和分离叶绿体色素的方法 2. 探究绿叶中含有几种色素 三．实验材料用具 材料：新鲜的绿色叶片（如菠菜的绿叶）。无水乙醇，层析液，SiO2、CaCO3 用具:干燥的定性滤纸，烧杯（100ml）,小试管，试管架，培养皿盖，棉塞，研钵，玻璃漏斗，尼绒布，毛细吸管，剪刀，药勺，量筒（10ml）,天平，铅笔 四．实验步骤 1.提取绿叶中的色素 取材：用天平称取5g的新鲜绿叶，剪碎，放入研钵中。向研钵中加入少许SiO2、CaCO3 ，再加入10ml无水乙醇，进行快速，充分的研磨。 过滤：将研磨液迅速倒入玻璃漏斗（漏斗基部放一块单层尼绒布）中进行过滤。将滤液收集到小试管中，及时用棉塞将试管口塞严。 2.制备滤纸条 将干燥的定性滤纸剪成略小于试管长与直径的滤纸条，将滤纸条的一端剪去两角，并在距这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。 3.画滤液细线 用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀的画出一条细线。待滤液干后，再画一两次 4.分离绿叶中的色素 将适量的层析液倒入烧杯中，将滤纸条（有滤液细线的一端朝下）略微倾斜靠着烧杯的内壁，轻轻插入层析液中，随后用培养皿盖盖住烧杯口。注意，不能让滤液细线触及层析液 5.观察与记录 几分钟以后，打开培养皿盖，取出滤纸条，干燥后观察滤纸条上的色素带，以及每条色素带的颜色和宽度，将观测结果记录下来。 6．观察结果分析结果：滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带（如下图） 最宽：叶绿素a（蓝绿色）； 最窄：叶绿素b（黄绿色）； 相邻色素带最近：叶绿素a和叶绿素b； 相邻色素带最远：胡萝卜素（橙黄色）和叶黄素（黄色）。 实验关键点 1.选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片。如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等。 2.画滤液细线时，应以细、直、颜色浓绿为标准，重复画线时必须等上次画线干燥衙再进行，重复2-3次。 3.层析时不要让滤液细线触及层析液。 实验总结 在研磨绿叶时，加入少许SiO2是为了研磨得充分，加入少许的CaCO3是为了防止研磨过程中色素受到破坏，加入10ml无水乙醇是使色素溶解在其中，便于提取； （2） 因无水乙醇和层析液都是易挥发且层析液是有一定毒性的有机溶剂，所以研磨要快，收集的滤液要用棉塞塞住，层析时要加盖，尽量减少有机溶剂的挥发。 （3）用毛细吸管画滤液细线时，线条越细越直效果越好，重复划几次的目的是使滤液细线中含有较多的色素 （4）如果层析液浸没了滤纸条上的滤液细线，滤纸条上就不会出现色素带，其原因是滤液细线中的色素溶解在了烧杯中的层析液中，会导致色素带不清晰，影响整个实验的效果。 课堂巩固练习 1..．提取高等植物叶绿体中的色素，在研磨时加入少量CaCO3的作用是 A．调节PH值，加速叶绿素溶解 B．使叶片研磨充分 C．调节PH值，保护叶绿素不被破坏 D．促使4种色素的分开 2．通过纸层析分离叶绿体色素，结果在滤纸条上出现四条色素带，从上而下依次为： A．胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b B．胡萝卜素、叶绿素a、叶绿素b、叶黄素 C．叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、胡萝卜素 D．叶黄素、叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素 3．做色素提取和分离实验的正确装置是图中 4．在叶绿体中色素的提取与分离实验中，扩散速度最快的色素是 A．叶绿素a B．叶绿素b C．叶黄素 D．胡萝卜素 5．下列哪一种液体不能作为叶绿体中色素提取液？ A．丙酮溶液 B．酒精溶液 C．水溶液 D．汽油 6．下面是有关叶绿体色素的提取和分离实验的问题，请回答： （1）实验中加入研钵内的丙酮的作用是 ；实验中加入研钵内的石英砂的作用是 ；实验中加入研钵内的碳酸钙的作用是 。 （2）