第四章--B真核调控.ppt

第四节 翻译的调控 一.mRNA运输控制（transport control）是对转录本从细胞核运送到细胞质中的数量进行调节; 二．mRNA翻译的控制 三．mRNA的结构和翻译的效率 四．翻译的起始调节 五．选择性翻译 六．反义RNA调控 七．翻译的自我调节 一mRNA运输控制 在细胞核内转录,在细胞质中翻译.在真核细胞核中剪接体滞留模型. 二mRNA翻译调空 降解控制,短寿命的mRNA的3’端非翻译序列中有一组富含AU的序列,与mRNA不稳定有关. 三mRNA的结构和翻译的效率 5’端帽子结构阻碍翻译,3’端poly(A)影响到mRNA的稳定性和翻译效率. poly(A)结合蛋白PABP,12nt. α和β珠蛋白的合成 在二倍体细胞中都有4个α-珠蛋白基因，它们之间的浓度比应是α：β=2：1， 而实际上是1：1 在无细胞系统中加入等量的αmRNA和 βmRNA和少量的起始因子, 结果合成的α-珠蛋白仅占3%。 当加入过量的起始因子时α珠蛋白和β珠蛋白之比为1.4：1，接近1：1， 表明翻译起始因子和两种mRNA的亲和性不同。 六反义RNA调空 1984年Adelman等发现大鼠中的促性腺激素释放(GnRH)的基因两条链都能转录,首次在真核中发现了反义RNA. 七翻译的自我调节 真核生物中也存在蛋白质合成的自我调节. 微管蛋白注射到哺乳动物细胞中,会抑制微管蛋白的进一步合成. 第八节 细胞周期的调控 真核生物细胞有丝分裂周期有两个关键的过程： 一.细胞周期与调节 “起点”（start）， M期进入限制点（commitment to M phase） 成熟促进因子。（muturior promoting factor， MPF）。后又称为M期促发因子（M-phase puomoting factor,MPF）。 周期蛋白 (cyclin) 在M期活化的p34-cycin B可以使下面一组蛋白磷酸化 (1)使层连蛋白（Lamins）磷酸化，使得细胞 在分裂期核模解体； (2)使组蛋白H1磷酸化,导致染色体的凝聚； (3)使微管蛋白磷酸化，导致细胞骨架的重新 组合，为细胞分裂做好准备； (4)使泛蛋白连接酶体系（Ubiquitin ligase system）磷酸化，此即是依赖泛素的蛋白 水解酶，它们经磷酸化激活后可使 Cyclin-B的降解，促进细胞进入G0/G1。 第一节 DNA水平的调控 一. DNA的甲基化与去甲基化 怎样判断哪些位点甲基化,哪些位点没有甲基化,采用同裂酶来处理待测序列,比较相应切点,就能弄清楚. 571-572 Hpa 二.亲本印记(imprinting) 印记:来源于父母本的一对等位基因表达不同。如源于父本的IGF-Ⅱ (胰岛素样生长因子Ⅱ)基因可表达，而源于母本的则不能表达。此是由于卵母细胞中的IGF-Ⅱ 已被甲基化，而精子中的IGF-Ⅱ未被甲基化，所以这一对等位基因在合子中表现不同。 目前在人类和鼠身上已辨明了20种印迹基因。大多数人类的印迹基因集中在三个簇中。在每个基因簇上都存在着特异的印记盒 (imprinting box)，能顺式调节印迹基因的亲本特异性表达，这些位点表现出亲本特异性的甲基化作用和去甲基化作用。 注解(2.4.1DNA后成遗传与印记基因 DNA后成遗传学由胚胎学家Waddington1953年提出。 后成遗传：（ epigenetic inheritance）是指基于非基因序列改变所致基因表达水平变化，如DNA甲基化和染色质构象变化等 。 印记基因（imprint gene)：由于一些可遗传的修饰作用（如甲基化）使配子（精子或卵子）中某个单一的等位基因的活性（monoallelic activity）在胚胎发育中具有标记性特点。 DNA甲基化是后成遗传的，独立于DNA密码遗传之外。) 在小鼠早期胚胎中，父系等位基因为非甲基化而表 达，母系等位基因因甲基化而沉默。 在子代小鼠形成配子时发生了什么？ 亲本的IGF-Ⅱ等位 基因在早期胚中被差异甲基化，在成体形成配子时仍保留原甲基化的模式。 第二节转录水平的调控 一．顺式作用元件和反式作用因子： 顺式作用元件P573 (1) 核心启动子成分 ， 如 TATA 框 ； (2) 上游启动子分分 ，如 CAAT框 ,G