核酸理化性质和研究方法.pptxVIP

本章小结1. 核酸的基本结构、核苷酸的组成成分2. 核酸的一级结构3. DNA的高级结构：二级、三级 Watson Crick的DNA双螺旋结构特点4. RNA的高级结构：二级、三级 RNA的类型与功能、tRNA的二级结构、核糖体亚基组成、原核与真核生物mRNA一级结构异同 课程测验1. 胸腺嘧啶除了在DNA中出现外，还出现在____(13年34题) : A. tRNA; B. mRNA; C. 5S rRNA; D. 18S rRNA.2. 与氨基酸结合的tRNA部位是____(12年36题) : A. 3’末端; B. 5’末端; C. N-末端 ; D. C-末端. 3. 下列核苷中，在真核生物tRNA和mRNA中都存在的是____(12年24题) : A. 胸腺嘧啶核苷; B. 腺嘌呤核苷; C. 二氢尿嘧啶核苷 ; D. 假尿嘧啶核苷. 课程测验4. 一段双链DNA包含1000个碱基对，其组成中G+C=58%，那么该双链DNA中T的含量是____(10年25题) : A. 58%; B. 42%; C. 29%; D. 21%. 5. 下列DNA模型中，属于左手螺旋的是____(09年24题) : A. Z-DNA; B. C-DNA; C. B-DNA ; D. A-DNA. 2014诺贝尔生理学或医学奖2016年10月6日，2014年诺贝尔奖生理学或医学奖揭晓，拥有美英双重国籍的科学家约翰·奥基夫、挪威科学家梅—布里特·莫泽和爱德华·莫泽夫妇共获殊荣，以表彰他们对大脑“定位系统”的重大发现。第十三章 核酸的理化性质与研究方法一、核酸的理化性质二、核酸的水解三、核酸的紫外吸收四、核酸的变性复性与分子杂交五、核酸的分离纯化六、核酸一级结构测定2015年农学门类联考考试大纲考点(一) 核酸的种类和组成单位(二) 核酸的分子结构1．DNA的分子结构：DNA的一级结构、二级结构、三级结构2．RNA的分子结构：tRNA的结构、mRNA的结构、rRNA的结构(三)核酸的理化性质1．核酸的一般性质2．核酸的紫外吸收特征3．核酸的变性及复性(四)核酸的分离纯化一、核酸的理化性质DNA纯品为白色类似石棉样的纤维状物，RNA纯品则呈白色粉末或结晶。溶解度：DNA和RNA微溶于水，不溶于乙醇、氯仿、乙醚等有机溶剂；在分离核酸时，加入乙醇即可将其从溶液中沉淀出来。DNA和RNA的钠盐更易溶于水，如RNA钠盐在水中的溶解度为4％，分子量在106以上的DNA在水中的溶解度达1％以上时，成具粘性的胶体溶液DNA和RNA在中性或弱碱性溶液中较稳定。二、核酸的水解碱基：嘌呤碱嘧啶碱二、核酸的水解1、酸水解 糖苷键比磷酸酯键更易水解，特别是嘌呤与脱氧核糖之间的糖苷键很容易水解。2、碱水解 通常用于RNA水解，DNA的碱水解比较困难。二、核酸的水解3、酶促水解◆酶的分类：底物 （DNase/RNase）◆作用方式: 外切酶/内切酶◆键的打开方式： 3’--OH 5’ --OH核酸外切酶(exonuclease)5’-核苷3’-核苷核酸内切酶(endonuclease)■ 核酸限制性内切酶 一类专一识别特殊核苷酸序列水解双链DNA的内切酶。 主要由细菌产生，如E. coli; 专一性极强高度特异的识别位点，这些位点通常在4至8个碱基对范围，且往往为回文结构; 切割后产生所谓粘性末端或平末端。 EcoRⅠ切割位点：—N-C-T-T-A-A-G-N-5’ 5’-N-G-A-A-T-T-C-N—↓↑ EcoRI 5‘ GAATTC 3’ 5’ G AATTC 3’ 3’ CTTAAG 5’ 3’ CTTAA G 5’ 5‘ GGCC 3’ 5’ GG CC 3’ 3’ CCGG 5’ 3’ CC GG 5’ HaeIII 限制性内切酶是分子生物学 研究的重要“工具酶”！ 三、核酸的紫外吸收三、核酸的紫外吸收紫外法测定核酸含量的理论基础(260nm) A260/A280 = 1.8:纯DNAA260/A280 = 2.0:纯RNA四、核酸的变性复性与分子杂交核酸的变性(Denaturation)：指核酸的双螺旋结构中的氢键断裂，成为两条单链的过程。核酸变性不涉及共价键(磷酸二酯键)的断裂，而核酸链的磷酸二酯键断裂称为核酸的降解。引起变性的