皮肤真菌检查技术精编版.ppt

（二）检验方法： 1．直接镜检：直接采取病变部位的标本，用显微镜检查有无菌丝及孢子的存在，本法迅速简便，是临床真菌检查最常用的方法 2．分离培养： 取毛发、皮屑、甲屑等标本，用70％乙醇消毒，接种沙保氏琼脂斜面培养基，25℃培养7～14天，根据菌落形态及颜色、并挑取菌落镜检菌丝及孢子的特征进行鉴定。 毛癣菌属 小孢子菌属 表皮癣菌属 3．荧光检查：本法主要用于头癣检查。病发在滤过紫外灯照射下可发出不同色泽的荧光，如黄癣菌病发呈暗绿色荧光，白癣小孢子菌属的病发呈亮绿色荧光等。 第三部分　深部感染真菌 深部真菌是侵犯皮下组织和内脏，引起全身性感染的真菌。 多数能引起慢性肉芽肿样炎症、溃疡及坏死等病变 深部感染真菌分两大类： 1. 致病性真菌： 此类真菌在正常人体内部不存在，一旦侵入机体，即可致病，如组织胞浆菌、球孢子菌、芽生菌等，属外源性，我国少见； 2. 条件致病性真菌： 是人体正常菌群的成员，当机体抵抗力下降时才致病，如新型隐球菌、白色念珠菌、曲霉菌和毛霉菌等。 一、白色念珠菌 白色念珠菌（canidia Albicans）又称白色假丝酵母菌，广泛存在于自然界，也存在于正常人口腔，上呼吸道，肠道及阴道，一般在正常机体中数量少，不引起疾病 。 为条件致病性真菌。 （一）生物学特性 卵圆形，大小2μm×4μm，革兰氏染色阳性。 有假菌丝。 培养特性：典型类酵母型菌落，表面光滑，呈灰白色或奶油色，有酵母气味。 涂片镜检，可看到表层为卵圆形芽生细胞，底层有较多假菌丝。 （二）致病性和免疫性 白色念珠菌可侵犯人体许多部位，可引起： 1. 皮肤念珠菌病：好发于皮肤皱褶处； 2. 粘膜念珠菌病：鹅口疮、口角炎、阴道炎最多见。 3. 内脏及中枢神经念珠菌病：肺炎、肠胃炎、心内膜炎、脑膜炎、脑炎等。 机体可产生一定免疫力。 （三）检验方法及鉴定 1．直接镜检：革兰氏染色镜检 2．培养特点：典型的酵母菌落。 3．鉴定试验 1）芽管试验：取少许待检的白色念珠菌接种于0.5ml人或兔血清中，混匀，直37℃水浴2-3h后，取出一接种环菌液，涂片、镜检。有芽管产生者为白色念珠菌，其他念珠菌不产生芽管。 2）TZC试验：将白色念珠菌接种于含0.005％氯化三本四氮唑的沙保培养基中，经22～25℃，24～48h培养， 白色念珠菌不变色或仅淡红色，其他念珠菌或酵母菌呈红色或深红色。 3）糖发酵和糖同化试验： 根据这两种试验可将常见的几种念珠菌进行鉴别。 4）动物实验： 本菌对兔有致病力。给兔耳静脉注射本菌，经4～5天死亡。解剖可见肾、肝肿胀、充血，并有小脓肿，涂片及培养均可见本菌及其假菌丝存在。 5）厚膜孢子形成试验： 本试验亦是鉴定白色念珠菌的重要方法之一，在玉米粉聚山梨酯－80琼脂培养基培养本菌，镜检观察到厚膜孢子及假菌丝。 4．血清学诊断 用于诊断全身性念珠菌病。以念珠菌为抗原测定机体抗念珠菌抗体 二、新型隐球菌 新型隐球菌又名溶组织酵母菌，是土壤，鸽类，牛乳、水果等的腐生菌，也可存在人口腔中。 可侵犯人和动物，一般为外源性感染，但也可能为内源性感染，对人类而言，它通常是条件致病菌。 （一）生物学特性 较大球形，直径可达5～20um， 有肥厚的荚膜，折光性强，一般染料不易着色，难以发现，称隐球菌， 用墨汁阴性显影法镜检 ，可见到透明荚膜包裹着菌细胞， 菌细胞常有出芽，但不生成假菌丝。 在沙保氏琼脂及血琼脂培养基上，于25及37℃皆可生长，而非病原性隐球菌在37℃不能繁殖。 酵母型菌落，呈白色。 本菌能分解尿素，以此与酵母菌和念珠菌鉴别。 （二）致病性 本菌大多由呼吸道转入，在肺部引起轻度炎症，或隐性传染。 侵犯中枢神经系统，发生脑膜炎、脑炎、脑肉芽肿等。 此外可侵入骨骼、肌肉、淋巴结、皮肤粘膜引起慢性炎症和脓肿。 （三）微生物学检验 1．直接镜检：常用墨汁涂片法。 2．分离培养： 在沙保培养基上，室温、37℃2～3天即可长出典型 酵母型菌落。有荚膜者菌落粘稠。 3．糖同化及发酵试验：本菌不发酵各种糖类，但能同化葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、半乳糖、肌醇，不同化乳糖。 4．酚氧化酶试验：在含Ｌ－多巴橘橼酸铁和咖啡酸培养基中，经２～５天培养，新型隐球菌出现棕黑色菌落。 ５．尿素酶试验：新型隐球菌产生尿素酶，在尿素培养基（含尿素及酚红指示剂）中分解尿素形成氨和CO2，以致培养基的pH值升高，使酚红由黄变为粉红色为阳性，而白色念珠菌为阴性。 谢　谢 病原性真菌检验 河北省望都皮肤病防治院 张维娜 真菌（Fungus） 具有典型细胞结构（细胞核、细胞器、细胞壁） 细胞壁含几丁质和（或）纤维素 无根、茎、叶，不含叶绿素 以腐生或寄生方式