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核酸的研究历史和重要性;核酸的研究历史和重要性;核酸的研究历史和重要性;遗传物质是核酸肺炎球菌转化试验;噬菌体转染试验;作为遗传物质必须具有以下的特性:;第一节 细胞中的遗传物质;;原核细胞 真核细胞;细胞核与细胞质中都存在DNA ;RNA作为遗传物质 ;一、细胞核内的遗传物质;;二、细胞质内的遗传物质;1、线粒体(mitochondria) ;;2、叶绿体(chloroplast);;;3、核糖体(ribosme);4、质粒(plasmid);;;第二节 DNA的组成;;脱氧核糖;核糖的几种构象(核糖呈折叠的五元环);碱基(base);;碱基的酮式和烯醇式;磷酸(phosphate);核苷和核苷酸;;多核苷酸链;DNA 的一级结构; DNA一级结构的表示法;;第三节 DNA的二级结构 (双螺旋结构);一、双螺旋结构提出的前期重要工作; 2,DNA纤维的X-光衍射图;二、B-DNA双螺旋结构;1,反向平行的多核苷酸链磷酸核糖骨架位于外侧;2、碱基 配对 C-G A-T ;3、双螺旋结构;;4、大沟和小沟和结构参数;; 大沟中碱基差异容易识别 ,往往是蛋 白质因子结合特异DAN序列的位点;四、DNA的双螺旋结构稳定因素;;五、DNA的双螺旋结构的意义;第四节 A-DNA,B-DNA,Z-DNA比较;B-DNA 资料来自相对湿度为92%所得到的DNA钠盐纤维;多核苷酸链含有许多可转动的键。磷酸二酯键的两个P-O键、糖苷键、戊糖环各个键;苷键的顺式和反式构象;;A-DNA B-DNA Z-DNA;;三种DNA双螺旋构象比较;第五节 DNA的变性和复性;DNA的紫外吸收性;;一、DNA的变性变性 danaturation:在物理、化学因素影响下, DNA碱基对间的氢键断裂,双螺旋解开,伴有A260增加(增色效应),DNA的功能丧失。;DNA变性(熔解)过程;;;;Tm:熔解温度(melting temperature);Tm的大小与DNA分子中(G+C)的百分含量成正相关,测定Tm值可推算核酸碱基组成及判断DNA纯度。同时,溶液的离子强度和环境条件也会影响Tm值;影响 Tm值的因素;;;盐浓度对Tm值的影响;有变性剂存在时;二、DNA的复性renaturation;复性条件;复性机制;复性机制;;如DNA仅部分变性,它的复性表现???快速的一级反应。;影响DNA复性过程的因素 :;;复性动力学的研究方法;;Cot 曲 线 ;重排成C/C0 =1/(1+kCot)。复性的分数C/C。是起始浓度和经过时间的乘积Cot的函数,这样的函数可以绘成下面的图,称为Cot曲线。; 各个不同的DNA的cot值是不同的,不仅与k值相关, 而且DNA分子序列的复杂性影响k值。 ;;;三、分子杂交;;;;探针标记物的选择;常用的标记物;核酸分子杂交技术;固体支持物种类;常用固相杂交类型;;; ;基因芯片(Gene Chip);基因芯片;;光原位固相合成;芯片杂交;;芯片技术的应用;;;第七节 DNA的精细结构;问题:B-DNA结构都一样吗? Is all B-DNA structurally identical?;DNA片段的X射线衍射分析指出,它的螺旋扭转角是在28-42度间变动的.而不是36度.;单核苷酸上有7个可旋转的键;在DNA中,随碱基序列的不同,螺旋的参数也有许多不同.;;;;第八节 超螺旋DNA;;;超螺旋DNA是几乎一切DNA,无论是环型或线型DNA的共有的重要特征。;超螺旋结构的方向性;;;;超螺旋是DNA三级结构的一种普遍形式,主要是负超螺旋。;;DNA的变化情况:;EB对超螺旋结构的影响;;二、拓朴异构酶;拓朴异构酶可分I型和II型两类;拓扑异构酶的类别和特性;原核拓扑异构酶I的作用机制;原核拓扑异构酶II的作用机制;旋转酶(gyrase) TopⅡ亚类之一;第九节 染色质的结构;;核小体(Polynucleosome)是DNA在细胞内存在的形态;;;组蛋白( Histones);;;;;核酸酶处理后的电泳图谱;一步步形成染色体结构;;;DNA中的一些不寻常结构(了解);;;;;;第十节 DNA的限制图谱和序列分析;一、限制性内切核酸酶;限制性内切酶大致分为两大类;狭义限制酶指类型II的限制酶;限制酶的特点;;;限制酶的用途;;二、DNA的序列分析;;;;;;;
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