(七)固定液和保存液的介绍.docVIP

（七）固定液和保存液用固定液固定动植物整体或它的一部分组织和气管等，能保存组织内细胞的形态、结构及其组成，尽量使它近于生活状态。固定液一般有防腐和保存的作用，分为单纯固定液和混合固定液。单纯固定液中最重要的有乙醇、福尔马林、醋酸、苦味酸、铬酸、重铬酸钾、升汞等，前两种固定液是中学生物实验室常用的。单纯固定液的优点是简便，缺点是有一定的局限性，不易达到理想的固定要求。混合固定液有几种不同的药液按一定的比例混合而成，使各自的优缺点相互补充，成为较完美的固定液。这种固定液的制备虽比较麻烦，但是效果比较好。常用的混合固定液是醋酸-酒精混合液、福尔马林-醋酸-酒精液、包因氏固定液等。常用的保存液大致跟固定液相同，主要是福尔马林、酒精、甘油以及由这些药物按比例配制成的各种混合液。有时按特殊保存的需要，再保存液中增加某些药品（如原生标本的保存液）。1、福尔马林福尔马林在固定组织标本时杀菌能力强，所以防腐性强，渗透力大，固定得快。永福尔马林固定精细的解剖标本时，要跟甘油、酒精、石炭酸等混合使用。固定液常用的浓度是5～10%（根据材料的大小、性质和数量而定）。 保存液常用的浓度是5～10%。用福尔马林作保存液，效果好且价格低廉。在配制福尔马林溶液（固定液或保存液）时，应将37～40%的甲醛作为整个溶质来配。例如配制5%福尔马林是取市售37～40%甲醛溶液5毫升跟95毫升蒸馏水混合。实际上甲醛含量只有1.9～2%，这样的配法已成为一般实验室常用的惯例。注意事项：（1）福尔马林业在长期贮存中会产生蚁酸，可适量的加入碳酸钙（ ）或碳酸镁（ ）等碱性物质进行中和。（2）福尔马林业作为保存液会慢慢挥发而致使浓度降低，并且福尔马林液再保存中往往形成多聚甲醛，使浸液变浊，影响观察。所以，根据一定保存期的情况，可适当增加福尔马林液的浓度或更换新液，以防标本变坏。其中如有白色沉淀物，加热后可使它溶解。 （3）市售的福尔马林液常带有酸性，能腐蚀石灰质，因此，最好不用福尔马林液浸制有石灰质外壳的动物。2、酒精（乙醇）酒精也是常用的固定液，它有强烈的杀菌作用，对组织材料的渗透力较大，固定的快。但是，它的脱水作用较强，在高浓度的酒精中容易使材料显著硬化和收缩。一般用于固定浸制标本材料，分一级或二级固定，即70%或50%与70%的酒精。有些小型材料或精细的解剖材料，最好用二级或三级固定，即用50%、70%或50%、60%、70%的酒精，最后再进行保存。从经济效果来考虑，一般酒精应跟福尔马林液等固定液混合使用。市售的工业用酒精浓度是95%左右，因此用时要重新配制。保存液的浓度通常是70%。注意事项：（1）在固定材料时要注意固定的效果，小型材料一般放在固定液中固定。大型材料必须先往体内注射一部分固定液，再放入固定液中，防止材料内部腐怀变质。用福尔马林液固定也是如此。（2）高浓度的酒精有脱水、脱脂作用。含有多量脂肪或拟脂标本（如脑、脊髓）等都不宜用较高浓度的酒精作保存液。（3）为了防止酒精使标本硬化，保存一些精细的材料或解剖标本时，因加入少量甘油，因为甘油具有润软组织的作用。（4）忌跟铬酸、锇酸和中铬酸钾等氧化剂配合。3、醋酸醋酸即乙酸，纯醋酸在低于16.7摄氏度时会凝成冰状固体，所以叫冰醋酸。醋酸能很快穿透组织，因为它不能沉淀细胞质中的蛋白质，组织不会硬化。一般常跟酒精、福尔马林、铬酸等容易引起组织变硬和收缩的液体混合，以起到相互抵消的作用。醋酸固定液的常用浓度是0.3%～5%。4、苦味酸苦味酸是一种黄色结晶，能溶于水（溶解度是0.9～1.2%）、酒精（溶解度是4.9%）和苯（溶解度是10%）。苦味酸也能沉淀一切蛋白质，穿透较慢，固定后，组织收缩明显，但不使组织硬化。 苦味酸固定液可以在100毫升蒸馏水中加入苦味酸约1.5克，制成饱和水溶液。固体苦味酸易爆，长制成饱和水溶液保存。5、升汞升汞又叫氯化汞，是白色粉末，以针状结晶为最纯。通常固定时用饱和水溶液，有时也用70%酒精作溶剂，不单独用作固定剂。升汞的穿透力较弱，通常用于小型材料，对蛋白质有强烈的沉淀作用，硬化程度中等。固定液用饱和溶液，浓度约为7%。6、卡尔氏（Carls）液配方95%酒精 170毫升 蒸馏水 280毫升福尔马林 60毫升 冰醋酸 20毫升冰醋酸要在临用前加入。这时极好的昆虫保存液，常用来杀死和保存小型、身体柔软的种类入螨、蜈蚣、马陆等。在这溶液里加入少量甘油，能防止虫体变脆。7、卡诺氏（Carnoys）液配方纯酒精 6份 冰醋酸 1份氯仿 3份这种固定液能固定细胞质和细胞核，尤其适宜于固定染色体，所以多用于细胞学的质片，还用来固定腺体、淋巴组织以及原生动物的胞壳等。这种固定液穿透得快，因此一般小块组织固定20～40分钟，大型材