第三章非细胞型生物.pptxVIP

●病毒发现的历史 Ivnowsky (1892): TMV Beijerinck (1898)： ‘ filterable virus’ Loeffler（1898）口蹄疫病毒 Towort（1915）噬菌体;非细胞生物： ----真病毒 ----亚病毒： 类病毒、拟病毒、朊病毒;§1 . 病毒（真病毒） ●病毒 病毒是一类核酸和蛋白质等少数几 种成分组成的超显微非细胞生物，本 质是一种只含DNA或RNA的遗传因子， 能以感染态和非感染态两种状态存在。 ;病毒的分类： ●寄主： 动物病毒、植物病毒、噬菌体 ●遗传物质： DNA病毒、RNA病毒、 ●形态： 杆状 (螺旋状）、多面体、复合型;●病毒的特征 1.形态极其微小 2.无细胞构造的分子生物 3.只含一种核酸 4.高度的寄生性 5.通过装配方式进行繁殖 6.离体可保持长期的侵染活性 7.对抗生素通常不敏感 8.有些能够整合到寄主的基因组中 ;●病毒与人类： 1）病毒对人类健康的危害 2）对人类生活的影响 2）病毒作为分子生物学研究的工具： ----DNA是遗传物质的证明 （噬菌体感染实验） ----遗传物质转移的载体(转染) ----蛋白质工程（噬菌体展示技术);建议读物：;H5N1型禽流感病毒（蓝色）正攻击红色细胞; 疯牛病;病毒的计量 单位： nm 病毒的基因组： Qβ：3个基因;（二）病毒粒子结构与组成 ;病毒 粒子 ; ●病毒的群体形态 1、包涵体（病毒）： 昆虫病毒在宿主细胞内聚集而成的晶体结构。;2、噬菌斑 3、空斑;;（三）病毒核酸（基因组）;●HBV（人乙肝病毒）的缺口环;●多分子基因组（流感病毒）;（四）噬菌体形态 1、噬菌体的模式结构：T偶数噬菌体;●噬菌体形态;二、病毒的繁殖方式 （一）噬菌体 ●烈性噬菌体 感染后短时间内能连续 完成繁殖过程而使宿主细胞裂解的噬菌体。 ●温和噬菌体 感染后其基因组整合到宿主的基因组上，并随宿主基因组的复制而同步，而不引起宿主细胞的裂解的噬菌体。;●繁殖过程（烈性噬菌体）：;1）吸附：尾丝与宿主表面特异受体结合 2）侵入：溶菌酶水解肽聚糖，核酸进入宿 主细胞。 3）增殖：控制细胞代谢系统，合成噬菌体 的各种 “部件”。 ;增殖过程的3阶??： ;; ●噬菌体的测定(效价的测定) 效价:生物制品活性（数量）高低的标志， 通常采用生物学方法测定。 噬菌体效价： 又称噬菌斑形成单位（pfu）数,指每毫升试样中含有侵染性噬菌体的粒子数。;●双层平板法;●双层平板法测定效价的优点 1）弥补平板不平 2）噬菌斑位于同个平面，较清晰 3）上层为半固体培养基，有利噬菌体 扩散; ●一步生长曲线（Debruck，1939） 定量描述烈性噬菌体生长规律的 实验曲线，用于反映各种噬菌体潜伏 期、裂解期和裂解量的特征曲线。;1、用噬菌体的稀释液感染高浓度的宿主细胞； 2、数分钟后，加入抗噬菌体的抗血清（中和未吸附的噬菌体）； 3、将上述混合物用培养物大量稀释，终止抗血清的作用和防止新释放的噬菌体感染其它细胞； 4、保温培养并定期检测培养物中的噬菌体效价（对噬菌体含量进行计数）； 5、以感染时间为横坐标，病毒的效价(噬菌斑数/ml)为纵坐标，绘制出病毒特征性的繁殖曲线；;●裂解期： ●平稳期： 效价最高期 ●裂解量： 每个受染细胞产生的噬菌体的总数。 （平稳期pfu/ 受染细胞？）;●温和噬菌体 溶原性（溶原现象）:温和噬菌体侵入宿主后并不引起宿主细胞裂解的现象称之。 溶原菌：受温和噬菌体感染的宿主称之为溶原菌。 前噬菌体：整合在宿主基因组上的温和噬菌体的核酸。;●溶源原因 1) 合成阻遏蛋白，阻遏噬菌体mRNA合成 (关闭某些噬菌体蛋白基因(晚期蛋白） 的表达) 2) 整合酶的合成;● λ噬菌体整合过程;●温和噬菌体的自发或诱发裂解 UV、X射线和氮芥子气能干扰或 破坏阻遏蛋白的作用，从而使噬 菌体失去溶源控制，进入裂解过 程。;●λ噬菌体感染结果;●温和噬菌体存在状态 ---- 游离态 ----整合态 ----营养态;●温和噬菌体的检查;(二) 植物病毒和动物病毒 ●植物病毒的特点 ----病毒粒子形态螺旋对称 ----通过昆虫、伤口等传播途径进入宿主细胞 ----核酸主要为SSRNA ----引起花叶、黄化、从枝、枯斑等症状;●植物病毒形态;+SSRNA： RNA的