实验十环境因素对微生物的影响.ppt

本实验注意事项 １．上午组的菌悬液请勿倾倒，以备下午组或晚上组使用．当天菌悬液使用完后必须洗刷． 实验十 环境因素对微生物的影响 一、实验目的 1.了解物理因素、化学因素及生物因素抑制或杀死微生物的作用及实验方法 2.了解同一微生物对不同因素及同一因素对不同微生物的不对应关系 二、实验原理 与其他生物（动、植物）一样，微生物的繁殖是通过与环境进行物质和能量交换而实现的。不同环境因素对微生物的生长繁殖影响不同，同一因素因其浓度或作用时间不同对微生物的影响亦不同；有的是微生物生长繁殖必要条件，有的表现为抑制作用或杀菌的作用。环境因素从总体上分为化学因素、物理因素、生物因素和营养因素四大类。而营养因素由培养基条件决定，本实验着重考查化学、物理、生物三个因素，了解如何控制环境条件使有益微生物得以正常生长，而有害微生物受到抑制或被杀死，从而更好的利用微生物。 化学因素 紫外线 ： 紫外线对微生物有诱发突变和致死作用，因紫外线照射剂量不同而异，低剂量用于微生物诱变育种，高剂量用于实验室或工作间消毒杀菌。紫外线照射剂量与照射光强、距离以及照射时间相关。温度 ： 微生物的生命活动，必须在一定温度范围内进行，温度过高或过低，均会影响其代谢方式、生长速度甚至可能致死微生物。根据微生物生长最快的温度可以测定微生物的最适生长温度。不同微生物最适生长温度不同 物理因素 生物因素 许多微生物在其生命活动过程中能产生某种特殊的代谢产物，具有选择性地抑制或杀死其他微生物的作用，例如抗生素。不同抗生素的抗菌谱是不同的，某些抗生素只对少数细菌有抗菌作用，例如青霉素一般只对革兰氏阳性菌有抗菌作用，多粘菌素只对革兰氏阴性菌有作用，这类抗生素称为窄谱抗生素；而另一些抗生素则对多种细菌有作用，例如四环素、土霉素对许多革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都有作用，这类抗生素称为广谱抗生素。 青霉素 ：抑制细胞壁的合成，窄谱抗生素 链霉素：抑制蛋白质的合成 ，广谱抗生素 三、实验器材 1. 菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、 枯草杆菌、啤酒酵母 2. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、8支牛肉 膏蛋白胨液体培养基、8支葡萄糖 蛋白胨液体培养基pH3、5、7、9, 3.药品等：75%乙醇、紫药水、碘酒、红药水、　　　　　青霉素、链霉素溶液, 　　　　　4支无菌水。 1. 物理因素对微生物的影响 ①紫外线对微生物的影响(2皿/组） 制肉膏平板 无菌操作制枯草,金葡(同时制大肠,啤酒)的菌悬液(菌悬液要明显看到混浊）,分别取枯草,金葡菌悬液各0.2mL平板涂布 在超净台内，打开平皿，放三角形黑纸（黑面朝上） 紫外照射30min 取出黑纸盖上平皿 37℃培养24h观察培养基中微生物的生长状况(黑纸盖住部分和其他部分）。 四、实验步骤 注意:吸取菌悬液前须将其混匀 培养前取出黑纸 紫外线照射平板 培养前取出黑纸 取菌悬液0.2ml接入液体培养基,4支接种大肠杆菌,4支接种枯草杆菌 放入100℃水浴中，经常摇动, 10min后取出4支(其中2支大肠,2支枯草) 流水冷却 30min后取出剩余4支 流水冷却 37℃培养24h观察培养液的混浊度。 注：记录生长情况用符号表示：　　 -：不生长； +：生长差； ++：生长一般； +++：生长良好。 ② 温度影响 （牛肉膏蛋白胨液体培养基8支） 注意：吸取菌悬液前须将其混匀 注意：水浴锅里的试管须经常摇动混匀 ①pH的影响：取pH 3、5、7、9 的2套葡萄糖蛋白胨液体培养基，分别接种大肠杆菌、啤酒酵母菌悬液0.2ml 37℃培养24h观察培养液混浊度。 ②化学药物的影响：(2皿/组) 用平板涂布法分别接种大肠杆菌、金黄色葡萄球菌菌悬液0.2ml ，按顺序将浸有75%乙醇、紫药水、碘酒、红药水的滤纸片〔在培养皿边上沥干药液〕贴在培养基上 37℃培养24h观察抑菌圈的大小。 2. 化学因素对微生物的影响 注意：吸取菌悬液前须将其混匀 按顺序贴滤纸片,不需额外做标签颜色不同 标签贴到培养皿底部近边缘位置，以免影响结果观察 标签位置 培养皿底 无菌操作，分别取浸有青霉素、链霉素的滤纸条放于平皿一侧 无菌操作从滤纸边缘垂直向外划直线接种大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌(使用平板种接种菌苔） 37℃培养24h观察抗菌谱。 3.生物因素对微生物的影响(2皿/组 ） 注意：接种线上要反复涂