实验一薄层色谱和纸色谱.ppt

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实验目的 学习色谱法的原理 掌握使用薄层色谱和纸色谱对化合物进行分离和鉴定 色谱法的一般原理 利用混合物各组分在固定相和流动相中的分配平衡常数的差异进行分离。当带有样品的流动相流经固定相时,由于固定相对各组分的吸附或溶解性能的不同,使吸附力较弱获溶解度较小的组分在固定相中移动速度较快,经过多次反复平衡,将混合物中各组分分离。 薄层色谱 薄层色谱:薄层色谱(Thin Layer Chromatography),常用TLC表示,是一种微量,快速和简便的色谱方法。一般是将固定相,如硅胶和三氧化铝,负载在一张薄层板上,将样品置于固定相之后,流动相通过毛细管效应从下往上流动而使样品分开。 TLC是有机化学实验室中使用的非常多实验操作,常常用来检测反应和柱色谱前判断使用展开剂的极性。 薄层色谱实验药品和仪器 药品: 偶氮苯,苏丹红,混合物(自配),环己烷/乙酸乙酯 9:1 仪器: TLC板,毛细管,广口瓶,铅笔 0.5cm 0.5 cm 1. 准备TLC板 2. 展开 展开剂:环己烷/乙酸乙酯 9:1 3. 干燥、显色 自身有颜色 有共轭体系的使用紫外灯 各种显色剂 4. 计算Rf值 Rf = D1/D2 5. 分析结果 通过比较Rf值,确定混合物中各组分分别是什么物质 纸色谱 纸色谱(Paper Chromatography):纸色谱法是以纸作为载体的色谱法。按分离原理属于分配色谱法的范畴。固定相一般为滤纸纤维上吸附的水分,流动相(展开剂)为有机溶剂。由于滤纸纤维的毛细管现象,溶剂在含水的滤纸上缓慢上升,流动相各组分在滤纸上受两相溶剂的影响,产生分配现象,亲脂性强的流动相中分配的多,移动速度快。 纸色谱实验药品和仪器 药品: 甘氨酸,亮氨酸,混合物(自配),展开剂(水/正丁醇/醋酸 5:4:1,取上层液体) 仪器: 滤纸,大试管,带钩塞子,铅笔 实验操作类似于TLC 展开装置图 两张色谱滤纸,分别点上甘氨酸, 混合物,以及亮氨酸,混合物 使用茚三酮乙醇溶液进行显色 通过比较Rf值确定混合物中各 组分。 注意事项 1、制板和活化:铺板厚度0.25-1mm且均匀;晾干;一块 一块铺;活化时烘箱要从低温开始 2、点样:画线时不能将板划破;点样斑点直径小于2mm, 斑间距1-1.5cm,标准左样品右;点样结束干燥后再 进行下一步 3、展开:展开剂用9:1的环己烷和乙酸乙酯混合溶剂, 一般原则:根据样品的极性、溶解度和吸附剂的活性等 因素考虑。溶剂的极性越大对样品的洗脱力越强。 4、显色:照原样画出斑点形状 5、要求在原始记录中画出板的真实展开情况并计算Rf值 人有了知识,就会具备各种分析能力, 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书,广泛阅读, 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍,我们能丰富知识, 培养逻辑思维能力; 通过阅读文学作品,我们能提高文学鉴赏水平, 培养文学情趣; 通过阅读报刊,我们能增长见识,扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操, 给我们巨大的精神力量, 鼓舞我们前进。 * * * *

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