载液组成对于卵白蛋白在非对称流场流分离通道中膜吸附和聚集行为.pdf

２０１８年５月 Ｖｏｌ．３６ Ｎｏ．５ Ｍａｙ ２０１８ ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ４８０～４８６ 研究论文 ＤＯＩ：１０．３７２４／ ＳＰ．Ｊ．１１２３．２０１７．１２０１４ 载液组成对于卵白蛋白在非对称流场流分离通道中 膜吸附和聚集行为的影响 １，２ ２ ２ １ １ １∗ 梁启慧 ，　 杨　 奕 ，　 邵　 兵 ，　 高　 也 ，　 宋　 宇 ，　 韩南银 （１，北京大学药学院，北京 １００１９１；２，北京疾病预防控制中心，北京 １０００１３） 摘要：非对称流场流分离技术对于蛋白质等生物大分子的分析具有温和、分离范围广的特点。 然而，在场流分离通 道中，受载液组成的影响而产生的蛋白质与通道膜的相互作用和蛋白质在通道内的聚集行为，会影响分析物的回 收率和尺寸形态，这些现象一定程度上限制了场流分离仪器的进一步应用。 该文研究了载液组成对于卵白蛋白在 ＋ ＋ ２＋ 非对称流场流分离中膜吸附和聚集行为的影响。 考察了不同ｐＨ（６２、７４、８２）、阳离子种类（Ｎａ 、Ｋ 、Ｍｇ ）及多 种离子强度（０～０１ｍｏｌ／ Ｌ）等条件对卵白蛋白洗脱过程的影响。 结果表明ａ）载液的离子强度越大，卵白蛋白的吸 附和聚集行为越严重；ｂ）ｐＨ和蛋白质的等电点ｐＩ 的相对大小决定了蛋白质的表面电荷，从而影响蛋白质的吸附 ２＋ 聚集行为；ｃ）二价阳离子Ｍｇ 更易引发通道中蛋白质的吸附和聚集。 这些结果有助于今后使用非对称流场流分 离技术分析蛋白质样品时，改善载液组成以获得更高的回收率，降低蛋白质聚集作用，对ＡＦ４更广泛地应用于蛋白 质生化分析中有较好的参考价值。 关键词：非对称场流分离；蛋白质聚集；载液；离子强度；蛋白质 中图分类号：Ｏ６５８　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 文章编号：１０００⁃８７１３（２０１８）０５⁃０４８０⁃０７ Ｉｍｐａｃｔ ｏｆ ｃａｒｒｉｅｒ ｆｌｏｗ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｎ ｍｅｍｂｒａｎｅ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ａｎｄ ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ ｏｆ ｏｖａｌｂｕｍｉｎ ｉｎ ａｓｙｍｍｅｔｒｉｃａｌ ｆｌｏｗ ｆｉｅｌｄ⁃ｆｌｏｗ ｆｒａｃｔｉｏｎａｔｉｏｎ １，２ ２ ２ １ １ １∗ ＬＩＡＮＧ Ｑｉｈｕｉ ，ＹＡＮＧＹｉ ，ＳＨＡＯ Ｂｉｎｇ ，ＧＡＯＹｅ ，ＳＯＮＧＹｕ ，ＨＡＮ Ｎａｎｙｉｎ （１．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｐｅｋｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １００１９１ Ｃｈｉｎａ； ２．Ｂｅｉｊｉｎｇ ＣｅｎｔｅｒｆｏｒＤｉｓｅａｓｅＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００１３ Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｓｙｍｍｅｔｒｉｃａｌ ｆｌｏｗ ｆｉｅｌｄ⁃ｆｌｏｗ ｆｒａｃｔｉｏｎａｔｉｏｎ （ＡＦ４） ｉｓ ａ ｋｉｎ