分子与细胞实验检测生物组织中的糖类蛋白质脂肪.pptxVIP

生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定第18～19页一.实验原理： 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如：①.还原性糖的鉴定：还原性糖+②.脂肪的鉴定：　 脂肪+ 脂肪+ ③.蛋白质的鉴定：蛋白质+④淀粉 +斐林试剂砖红色沉淀橘黄色苏丹Ⅲ红色苏丹Ⅳ双缩脲试剂紫色碘蓝色方法步骤： 1．实验材料、仪器和试剂的选择 2．设计记录表格，记录预测结果 3．检测的方法步骤 (1)还原糖的检测和观察; (2)脂肪的检测和观察; (3)蛋白质的检测和观察;注意事项:1.斐林试剂甲液和乙液分别是？甲液：NaOH浓度为0.1g/mL乙液：CuS04浓度为0.05g/mL2.斐林试剂要现配现用，不能放置太久？时间太长，Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。3.斐林试剂甲液和乙液的正确用法？甲液和乙液等量混合均匀后再注入组织样液。实验流程(步骤)1.可溶性还原糖 葡萄糖、果糖、麦芽糖等。含糖量较高的白色或近于白色的植物组织(排除色素对显色的干扰)，苹果、梨最好 。 选材：制浆：去皮、切块、研磨，制备组织样液：过滤：（用单层纱布）取液：（２mL）显色反应 刚配制的斐林试剂２mL50～65.C水浴加热2min２mL组织样液(用前混匀)变成砖红色呈现蓝色现象： 还原糖的检测和观察： 浅蓝色（Cu（OH）2） 棕色（浅蓝色和砖红色的混合物） 砖红色沉淀 （Cu2O）注意事项:1.双缩脲试剂A液和B液分别是？A液：NaOH浓度为0.1g/mLB液：CuS04浓度为0.01g/mL2.在蛋白质的鉴定试验中，为什么先加A液再加B液？先加A液是为了创造一个碱性环境，因为蛋白质在碱性条件下与Cu2+发生反应生成紫色化合物。3.双缩脲试剂A液加1mL，而B液只加4滴,为什么B液不加1mL或多于1mL？过量的双缩脲试剂B液会与A液反应，使溶液变蓝色，掩盖生成的紫色。3.蛋白质的鉴定 选材与制备组织样液：黄豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液）［黄豆浸泡 →去皮→切片→研磨→过滤→滤液］ ２mL组织样液双缩脲试剂Ａ　２mL双缩脲试剂Ｂ３－４滴显色反应(提供Cu2+)(创设碱性条件)现象：无色紫色或紫红色蛋白质的检测结果4、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同？比较项目试剂及成分溶液浓度方法加热与否结果可溶还原糖的鉴定斐林试剂NaOH和CuSO4砖红色沉淀蛋白质的鉴定双缩脲试剂NaOH和CuSO4溶液呈紫色NaOH浓度为0.1g/mLCuS04浓度为0.05g/mL先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合，而后立即使用。水浴加热NaOH浓度为0.1g/mLCuS04浓度为0.01g/mL先加入Na0H1mL，然后再加CuS044滴，摇匀。(不能过量)不需要脂肪微粒2.脂肪的鉴定 取材：花生种子（浸泡３－４h），去皮，将子叶削成薄片 ①选取最薄的薄片移至载玻片中央②在薄片上滴加苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ) 染液2 － 3滴，染色２－３min制片：③滴加体积分数为50%的酒精溶液1—2滴，洗去浮色 (多余的苏丹Ⅲ )苏丹Ⅲ 或苏丹IV易溶于酒精④吸去余液，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片显微观察：先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察现象：有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒脂肪的检测结果4.淀粉的鉴定取材：马铃薯匀浆检测：碘液2滴２mL组织样液现象： 摇匀后变成蓝色 [例] 做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验时，需要根据实验需要选择不同的实验材料。请根据下表所列各种材料回答问题： 各种可供实验的材料梨黄桃胡萝卜黄豆花生种子小麦种子 ①其中适合于鉴定可溶性还原糖的是 ，理由是梨的组织细胞 ，你打算用什么试剂鉴定? 。 ②小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪，这是因为 ，你打算用什么试剂鉴定? . 梨 颜色为白色，并且糖含量较高 斐林试剂脂肪含量不如花生高，也不容易做切片 用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ试剂 [例] 做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验时，需要根据实验需要选择不同的实验材料。请根据下表所列各种材料回答问题： 各种可供实验的材料梨黄桃胡萝卜黄豆花生种子小麦种子③小麦种子中糖类化合物 含量很高，却不适合用来鉴定 __________，这是因为 ________________________________________。淀粉 可溶性还原糖 淀粉是非还原糖且不溶于水 ④适合于鉴定蛋白质的是 ，理由是 ，鉴定所用的试剂是 。 黄豆和花生 蛋白质含量高 双缩脲试剂1、青苹果汁遇碘液显蓝色，熟苹果汁能与斐林试剂作用产生砖红色沉淀，下列结论中最合理的是 ( ) A．青苹果汁中有淀粉，不含还原糖 B．熟苹果汁中含还原糖，没有淀粉 C．苹果转熟时，大量淀粉水解成还原糖 D．苹果转熟时单糖聚合成淀粉 C２