实验十 醋酸纤维薄膜电泳血清白蛋白分析.pptxVIP

实验十、醋酸纤维薄膜电泳－－ 血清蛋白分析和 人体动脉血压的测定;一、目的和要求 １、了解电泳的原理，掌握醋酸 纤维薄膜电泳的操作 ２、学习动脉血压的原理，测定 收缩压与舒张压;二、实验原理 （一）电泳 在外界电场的作用下，生物大分子从电极 一侧向另一侧移动的现象 1、蛋白质 由氨基酸通过肽键连接而成;2、等电点 (isoelectric point, pI) 在一定的pH条件下，当其正、负电荷数相等 时，整体便失去了所有电荷，这时的pH称为等电 点（pI）。 氨基酸在等电点时电泳移动速度为零 在碱性环境中，蛋白分子 负电 阳极 在酸性环境中，蛋白分子 正电 阴极;3、醋酸纤维素薄膜 (Cellulose Acetate Membranes) 采用醋酸纤维素为支持物的电泳方法叫醋 酸纤维薄膜电泳，具有很高的流速和热稳定性 以及非常低的吸附，将其溶于丙酮等有机溶剂 中，即可涂布成均一细密的微孔薄膜;4、血清蛋白电泳 将抽取的血液置入不加抗凝剂的试管中， 使血凝固后，析出的上清液就是血清。 血清中主要含白蛋白、球蛋白。; 血清蛋白电泳是一种临床化验检查项目。 由于蛋白的绝大部分均由肝脏合成，所 以，各种蛋白质的质与量的变化，除与免疫 性疾病等有关外，主要反映肝脏的生理、病 理情况; 血清中各种蛋白质的等电点均低于 pH 7.0，在pH 8.6的缓冲液中带负电， 向正极移动，分子小且带电荷多者，则 移动速度较快 ;;（二）血压测定 1、血压 是指血管内的血液对于单位面积血管壁 的侧压，目前采用千帕(KPa)为单位。以前 采用 mmHg 表示。 收缩压：收缩期动脉血压的最高值 (高压) 舒张压：舒张期动脉血压的最低值 (低压) ;2、血压测定方法 此次实验采用Korotkoff氏听诊法 正常的收缩压/舒张压 (mmHg) 收缩压: 130 mmHg 舒张压: 85 mmHg;;3、点样 （毛细管，一根，放回） 4、电泳 点样面朝下 点样端置于负极 5、染色 染色10min 6、漂洗 脱色各5min（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ） 最后，水洗;（二）侧血压 1、血压计的构造：减压计、袖带、 气球 2、安静时收缩压/舒张压 （120/80mmHg） 3、运动后的收缩压/舒张压 ;四、实验报告 1、将电泳后的醋酸纤维薄膜 贴在报告本上并在旁边用 铅笔按样描图 2、记录血压（安静、运动） 预习：实验十七