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髓系 MPO+(用FCM,免疫组织化学染色,细胞化学染色证实) 或单核细胞(至少有以下标志中的2项阳性:NSE、CD11c、CD14、CD64、CD36*、溶酶体 T细胞系 cCD3+(用抗CD3ε链的单抗及FCM分析,不能用免疫组化的抗CD3ζ链多克隆来检测,因为后者不是T细胞特异性抗原) 或sCD3+ B细胞系 CD19强阳性并同时有以下标志中的至少1项阳性:CD79a、cCD22、CD10 或CD19弱阳性并同时有以下标志中的至少2项阳性:CD79a、cCD22、CD10 白血病细胞的系列特异性标志 如有2 系或以上的特异性标志,可诊断为急性混合性白血病 流式I * . AML(病例1) 流式I * . ALL (病例2) 流式I * . FCM 的优缺点 优点: 一次可检测数万至数十万个细胞上的数十种标记,可同时检测每个细胞的六个以上参数,敏感性高,分析全面 更容易区分良恶性,恶性细胞的系列及成熟度 可帮助确定免疫治疗的靶点并监测疗效,如CD20、CD19是监测MRD覆盖面最广的方法。 快速、简便、重复性好 缺点: 不能确定组织结构,一些罕见的大细胞不能分析到,一些细胞粘附性高,难以抽出。因此对HL等难以确诊。 判断恶性细胞的比例不如形态准确,对M6、MDS的诊断不如形态 预后价值不如染色体和基因 流式I * . 诊断误区举例 原始细胞增多是诊断前体恶性血液病尤其AL的重要指标,但原始细胞应根据免疫学标志/基因/染色体证实为恶性造血前体细胞 一些形态上的原始细胞可以是正常造血细胞(尤其见于儿童感染后,G-CSF,GM-CSF等刺激或化疗后或移植后) * . 病例3 儿童B-ALL,化疗3年后停药,来我院复查,骨髓涂片8%的幼稚细胞 * . 流式幼稚B淋巴细胞增生,未见异常表型 * . 病例4 NK细胞白血病移植后40天,骨髓涂片8%的幼稚细胞 * . 流式: 未见表型异常细胞,CD34阳性细胞为幼稚B淋巴细胞 * . 中期分裂相的染色体分析 细胞遗传学C * . AML:50%~90%的患者细胞遗传学可检出异常克隆 ALL:大约60%~85%的患者可检出克隆性染色体畸变 细胞遗传学C * . * . * . * . * . 一些染色体有诊断价值: 如重现性染色体异常,如t(8;21),inv(16)、t(16;16)、 t(15;17)(q22;q12),t(5;14)(q31;q32) ,t(3;3),t(4;11)可直接诊断急性白血病; 一些染色体和/或基因有辅助诊断价值,如5q31、CEP7、7q31、CEP8、20q、CEPY、P53 高度疑似MDS等; 有-7、5q-、 t(3;3)、t(4;11)、t(9;22)、复杂染色体等的急性白血病预后不好 染色体的诊断价值 细胞遗传学C * . 有丝分裂相少或缺如 染色体质量低劣,显带不佳 染色体异常复杂 如果恶性细胞不分裂,其结果是假阴性 由于分析的细胞少,有部分白血病患者无染色体异常,监测残留白血病不敏感 白血病染色体分析存在的问题: 细胞遗传学C * . 荧光原位杂交(FISH) 利用已知核酸序列作为探针,以荧光素直接标记后与靶DNA进行杂交,最后在荧光显微镜下观察杂交信号,从而对标本中待测核酸进行定性、定位和定量分析 细胞遗传学C * . * . BCR/ABL双色双融合探针 * . BCR/ABL额外信号探针 * . 有独立的诊断及预后价值 可以检测出显微镜下人眼难以分辨的染色体异常 诊断时间比染色体短 与染色体分析比较,对诊断人员的经验依赖程度低 对不分裂的细胞也可以分析,分析的细胞数量比染色体多,更能反映正常和恶性细胞的比例,监测残留白血病比染色体敏感 可以对既往的骨髓片回顾分析,进一步明确或排除诊断 探针昂贵,每次只能分析1-2种异常,只能分析已知的染色体或基因异常 FISH的优缺点 细胞遗传学C * . .卫生. .管理. .卫生. .管理. .卫生. .管理. * .卫生. .管理. .卫生. .管理. .卫生. .管理. .卫生. .管理. .卫生. .管理. * .卫生. .管理. * .卫生. .管理. * .卫生. .管理. * .卫生. .管理. * .卫生. .管理. * .卫生. .管理. * .卫生. .管理. * .卫生. .管理. .卫生. .管理. .卫生. .管理. .卫生. .管理. 急性白血病的诊断、分型和预后 * . 白血病的概念 白血病是造血干/祖细胞发生恶变 * . 白血病的概念 分化障碍 增殖失控 原始和幼稚细胞增生累积 凋亡受阻 浸润其它器官和组织 原始和幼稚细胞
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