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(二)油浸镜检查 1、有核细胞分类计数 在油浸镜下连续分类计数200个或500个有核细胞,按细胞的不同系列和不同的发育阶段分别计数。其不同发育阶段细胞分别占有核细胞总数的百分数,再累计粒细胞系总数和幼红细胞总数,计算粒红比例(G:E)。巨核细胞另行单独计数,故不计入;分裂型细胞、退化或破碎细胞在分类计数时也不计入。 2、观察细胞形态 仔细观察各系列细胞的形态有无异常,并注意有无特殊的异常细胞出现。 * . (三)检查结果的分析 1、骨髓增生程度 (1)增生极度活跃(有核细胞量显著增多):反映骨髓造血功能亢进,常见于白血病。 (2)增生明显活跃(有核细胞量增多):反映骨髓造血功能旺盛,见于各种增生性贫血。 (3)增生活跃(有核细胞中等量):反映骨髓造血功能基本正常,见于正常人骨髓象。 (4)增生减低(有核细胞量减少):反映骨髓造血功能减低,见于再生障碍性贫血(慢性型)。 (5)增生明显减低(有核细胞量显著减少):反映骨髓造血功能衰竭,见于再生障碍性贫血(急性型)。 * . 2、骨髓中各系列细胞及其各发育阶段细胞的比例 (1)粒细胞系统:约占有核细胞的50%~60%。 (2)红细胞系统:幼红细胞约占有核细胞的20%。 粒红比例(G/E):以粒细胞系的百分数除以红细胞系的百分数即为粒红比例。参考值为2~4:1。 (3)淋巴细胞系统:约占有核细胞的20%,以成熟淋巴细胞为主。 (4)单核细胞系统:一般4%,系成熟型单核细胞。 (5)浆细胞系统:一般2%,以成熟阶段的浆细胞为主。 (6)巨核细胞系统:7~35个为正常值。 (7)其他细胞:可见到极少量网状细胞、内皮细胞、组织嗜碱细胞等非造血细胞成分。 * . 四、血细胞的细胞化学染色 (一)过氧化物酶染色 【原理】血细胞中的过氧化物酶(peroxidase,POX)能分解试剂中的底物H2O2,释出新生态氧,使无色联苯胺氧化为蓝色联苯胺,后者与亚硝基铁氰化钠结合形成蓝黑色的颗粒,沉着于细胞质中。 【结果】胞质中无蓝黑色颗粒者为阴性反应,出现细小颗粒、分布稀疏者为弱阳性反应,颗粒粗大而密集者为强阳性反应。 【临床意义】过氧化物酶染色主要用于急性白血病类型的鉴别。急性粒细胞白血病时,白血病细胞多呈强阳性反应;急性单核细胞白血病时呈弱阳性或阴性反应;急性淋巴细胞白血病则呈阴性反应。因此,POX染色对急性粒细胞白血病与急性淋巴细胞白血病的鉴别最有价值。 * . (二)中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP) 【原理】偶氮偶联法。染色原理是血细胞内的碱性磷酸酶将基质液中的α-磷酸萘酚钠水解,产生α-萘酚与重氮盐偶联形成灰黑色沉淀,定位于细胞质内酶活性所在之处。 【结果】碱性磷酸酶主要存在于成熟阶段的中性粒细胞(分叶核及杆状核),其他血细胞均呈阴性反应。 【参考值】成人NAP阳性率10%~40%;积分值40~80%(分)。 * . 【临床意义】 1、感染性疾病 急性化脓菌感染时NAP活性明显增高,病毒性感染时其活性在正常范围或略减低,可帮助细菌性感染与病毒性感染的鉴别。 2、慢性粒细胞白血病的NAP活性明显减低,类白血病反应的NAP活性极度增高,故可作为与慢性粒细胞白血病鉴别的一个重要指征。 3、急性粒细胞白血病时NAP积分值减低;急性淋巴细胞白血病的NAP积分值多增高;急性单核细胞白血病时一般正常或减低,故可作为急性白血病类型的鉴别方法之一。 4、再生障碍性贫血时NAP活性增高;阵发性睡眠性血红蛋白尿时活性减低。 5、其他血液病。 6、腺垂体或肾上腺皮质功能亢进,NAP积分值可增高。 * . (三)铁染色 【原理】人体内的总铁有一定量以铁蛋白和含铁血黄素的形式贮存在骨髓中的单核-吞噬细胞系统细胞的胞质内,幼红细胞胞质的线粒体中也含有含铁血黄素。这些铁在酸化的低铁氰化钾溶液中反应,生成蓝色的铁氰化铁沉淀,定位于含铁的部位。 【结果】 1、细胞外铁 观察骨髓小粒中贮存在单核-吞噬细胞系统内的铁。阳性反应为在骨髓小粒上见到呈浅蓝绿色均匀的无形物质,或呈蓝色或深蓝色的小珠状、粗颗粒状或蓝黑色的小块状物质。 2、细胞内铁 观察幼红细胞内的铁。正常幼红细胞(主要是晚幼红细胞)的细胞核周围可见到1~5个呈蓝色细小的铁颗粒。含有铁颗粒的幼红细胞称为铁粒幼细胞。如含粗大深染的铁粒在10个以上,并环绕细胞核排列超过核周径2/3以上者。 * . 【参考值】 1、细胞外铁 1+~2+,大多为2+。 2、细胞内铁 20%~90%,平均值为65%。 【临床意义】 1、缺铁性贫血时,早期骨髓中贮存铁就已耗尽,细胞外铁呈“-”。因此,铁染色是目前诊断缺铁性贫血及指导铁剂治疗的一项可靠和切合临床实用的检验方法。 2、非缺铁性贫血如球蛋白生成障碍性贫血,细胞外铁多增加,常3+~4+。 3、铁粒幼细胞性贫血时,
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