《病毒学》第8章 机体的病毒感染防治.ppt

d.传统疫苗的缺点 可能太温和以至不能引起有效的免疫反应 活疫苗 回复突变而引起疾病 污染有其它未减毒的病毒：如脊髓灰质炎病 毒疫苗中检测到SV40，这是因为用于制备疫 苗的病毒是在猴肾细胞中培养的，这种细胞 内经常污染有SV40。幸运的是SV40不是人类 的病原病毒。 灭活疫苗 灭活不彻底，部分病毒保留了感染性而引起疾病 灭活处理时，化学灭活剂，其中包括一些致癌物可能进入疫苗中 灭活疫苗进行预防接种所需要的病毒量大，因而成本较高 B．病毒疫苗研究进展 由于常规的全病毒疫苗存在上述缺点，所以人们就努力研制新的更为安全、有效的疫苗。 a.结合有其它病毒的克隆基因的重组体，这是一种基因工程疫苗。 构建原理： 利用重组DNA技术可将编码有任一特定的病毒蛋白质——外源基因，插入一无毒力的活病毒基因组中，用这种病毒重组体作为活疫苗进行预防接种，病毒在其繁殖细胞产生外源的病毒蛋白质，机体因而产生特异性免疫反应。 （虽然活病毒疫苗的缺点都在，但某些不能进行细胞培养来繁殖的病毒可以用这种方法来制备疫苗 ） 举例： 这种重组体病毒的原型是1983年构建的结合有乙型肝炎病毒表面抗原（HBSAg）的活痘苗病毒。 其构建的方法是： 将插入有乙型肝炎病毒表面抗原基因的痘苗病毒的一非必需基因（如胸苷激酶，TK）的克隆片段重组入细菌质粒中，强大的痘苗病毒启动子应置入外源基因（HBSAg）的上游适当位置，然后用这种嵌合质粒转染已经被野生型痘苗病毒感染的哺乳动物细胞。在受染细胞内，痘苗病毒DNA与质粒DNA发生重组，以适当的筛选程序就能够获得含有乙型肝炎表面抗原基因的重组体痘苗病毒。 将重组体病毒接种细胞培养或动物，病毒繁殖，受染细胞分泌乙型肝炎病毒表面抗原。刺激机体产生免疫力。 可以做为表达载体的病毒，还有腺病毒、SV40 、逆转录病毒。 b.利用基因重配制备的重组病毒疫苗：对一些有分段基因组的病毒，利用基因重配，把实验室毒株的（ts、ca或其它的）突变基因引入野生型病毒的新分离株中，较快地获得无毒力的疫苗株。 常规方法需经过细胞培养一代代筛选，这样通过基因重配，就大大的缩短了制备减毒活疫苗所需的时间。 c.纯化的、“克隆的”和合成的病毒蛋白质。 上述两种疫苗虽是利用基因工程方法或基因重组方法构建的，但仍是属于减毒的活疫苗。 由于特异性的抗病毒免疫系由能够诱导中和抗体的病毒表面壳体蛋白或包膜糖蛋白引起，所以利用不同的方法获得这些病毒蛋白质是新一代病毒疫苗研制的另一条途径。 根据制备方法不同，可分为亚单位疫苗、基因工程疫苗和合成多肽疫苗。 亚单位疫苗是利用化学试剂裂解病毒体，除去核酸，提取纯化能产生中和抗体的壳体蛋白或包膜糖蛋白所制备的疫苗。 优点：安全性好。与全病毒疫苗相比 除去产生不良反应的物质，减少副作用 可以除去病毒核酸，消除潜在致癌性 回复突变——减毒疫苗 复感染复回的问题——灭活疫苗 目前：有流感病毒、腺病毒、乙肝病毒（健康带毒者血浆内分离纯化） “克隆的”病毒蛋白质： 利用重组DNA技术克隆的病毒蛋白质基因，可以在不同的基因表达系统中高效表达，（原核细胞表达系统、酵母系统、重组体病毒系统）产生能诱导中和抗体的蛋白质，经过分离纯化来制备的疫苗。 优点： 可以产生目前尚不能在组织培养细胞中生长的病毒疫苗，如乙肝 可以完全除去病毒基因组中有潜在危险的基因（如癌基因） 利用重组体病毒系统可以制备多价疫苗，一次接种即可同时获得对多种病毒感染的保护。 目前从酵母中产生的乙型肝炎病毒表面抗原基因工程疫苗已投入应用生产。 合成多肽疫苗：由于不少病毒的抗原决定蔟的氨基酸序列已研究清楚，因而可以人工合成具抗原活性的多肽疫苗来代替全病毒疫苗，以减少感染的可能性。 缺点： 合成的病毒单位多肽分子量较小（没有脂质化），缺乏抗原决定蔟所具有的立体构形，所以免疫原性往往要低102~106，因而需要通过与载体蛋白结合或加佐剂来增强免疫效果。 如将肽链共价偶联到破伤风毒素、β-半乳糖苷或脂质体上再与氢氧化铝佐剂吸附。 d.核酸疫苗： 又称基因疫苗（genetic vaccine） 1990年Wolff等在做小鼠基因治疗试验时偶然发现，将编码基因的质粒DNA直接注射入动物肌肉细胞内，能在动物体内表达抗原并诱导机体产生免疫应答。这一发现打开了通往新的免疫途径的大门。由于不加任何