柱层析原理详解.pptxVIP

A Introduction to Chromatography ;Column Chromatography ;柱层;有机化学家能用的最现代化和尖端的方法全部包括某种类型的层析法. 层析法的定义是, 通过在两相之间的分配, 使一个由两种或多种不同化合物(有时是离子) 组成的混合物得到分离, 这两相中一相是固定的, 另一相则是移动的. 根据所包括的两个相的性质, 可有各种可能形式的层析法; 供普通使用的有固-液(柱, 薄层和纸), 液-液和气-液(蒸气相) 层析法. 所有层析法所根据的工作原理都是凭借于欲待分离的几种物质在将它们进行分配的两相之间的溶解度(或吸附度) 上的差别. ;吸附剂;吸附剂;;相互作用;相互作用; 影响分离的参数;A.吸附剂;吸附剂;吸附剂;B 溶剂;溶剂;溶剂;溶剂;溶剂;C 柱的尺寸和吸附剂量;;D 流速;流速; 装柱;装柱;;;装柱;装柱;B 干法; 上样;上样;上样; 洗脱; 柱的监控; 拖尾会干扰第二个组份的分离, 避免的一个办法是在洗脱时不断地提高溶剂的极性. 用这种方法时, 由於在峰的尾部处极性正在增大, 化合物就会比其前缘处移动得快, 从而使尾部紧缩, 形成一个更近乎理想的谱带; 几点注意;几点注意;几点注意;几点注意;; 分离时间短，效率高 操作简便 分离样品少;原理;; 确定展开剂 上板 展板 显色 刮板与洗脱 ;确定展开剂;上板; 用滴管吸取样品溶剂，缓慢并且匀速地在板上划一条直线 如果点样太宽，可用大极性溶剂将其展开至2~4cm，再吹干 不要污染板 线条尽可能细 如果可能，点样后先在 UV下检查 小心: UV 光线直接照射进眼里是有害的,最好带上眼镜，并用镊子夹住板 样品不能太多，否则会过载 由于边缘厚度不均匀及边缘效应,应留 5~8mm. ;CONFIDENTIAL; ; 正己烷（石油醚）/乙酸乙酯 氯仿/甲醇 正己烷（石油醚） / 丙酮;选择溶剂系统，必须经过多次的尝试，不断改变溶剂极性，根据板层情况， 选择最佳的溶剂体系 一般来讲，提高溶剂极性，化合物爬的越高 （反之则相反).;显色　;刮板与洗脱　; 板上的化合物是一片 样品过载 或者是由于你的样品十分不纯 板上的化合物拖尾 样品有酸性或碱性基团 (胺或羧酸) 有时在PTLC板会有严重的拖尾。加入几滴氨水或TEA(胺) 或醋酸 (羧酸) ; 尽快处理你的化合物,长时间与吸附剂接触会增加你的样品变坏的可能性 小心选择溶剂, 甲醇可能会溶剂硅胶板里的融解黏合剂及荧光物质, 选择氯仿，丙酮和乙醇会好一些; 如果可能的话，尽量选择低极性的溶剂 1g吸附剂需用大约5ml溶剂 柱层析有助于除去黏合剂和荧光物质;Thanks