临床微生物-—真菌概述、念珠菌和隐球菌.ppt

* * CHROMagar显色平板 真菌药敏试验 常用药物: 二性霉素B; 唑类（咪康唑、酮康唑、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑）; 氟胞嘧啶；棘白菌素类（卡泊芬净、阿尼芬净） 方法：E-test法、肉汤稀释法、 ROSCO纸片扩散法（适用于念珠菌） 培养基: RPMI 1640培养基（含谷氨酰胺和酚红指示剂，不含碳酸氢钠） 真菌药敏试验E-test法 热带假丝酵母菌 TZC试验： 氯化三苯四氮唑TZC培养基，菌落由无色变深红色或紫色 芽管形成试验：4小时（-），6小时（+） 厚膜孢子试验：－ 隐球菌属 Cryptococcus 隐球菌属(Cryptococcus)1894年在法国发现，我国1964年发现，有17种和8个变种 最主要的致病菌是新生隐球菌及其变种 新生隐球菌新型变种 新生隐球菌格特变种 新生隐球菌格鲁比变种 分 类 Cryptococcus neoformans 新生隐球菌，是土壤、鸽类、牛乳、水果等的腐生菌，也可存在人口腔中。以鸽粪中检出为多，人为外源性感染，经呼吸道侵入人体，主要侵犯肺、脑。是AIDS病最常见的并发症之一。致病物质是荚膜。 新生隐球菌 新型隐球菌引起的疾病 主要引起新型隐球菌性肺炎、脑膜炎（脑炎） 免疫功能低下者好发 艾滋病、糖尿病、SLE、淋巴瘤、器官移植等 新型隐球菌性脑膜炎（脑炎）死亡率高 一般病死率25%~30% 致病过程：吸入新型隐球菌孢子 肺炎 入血 脑膜炎（脑炎） 新型隐球菌脑膜炎（脑炎）临床特点 发病隐匿 50%慢性起病，40%亚急性起病，10%急性起病 以头痛为主，进行性加重，大多伴发热、恶心呕吐，95%有颈项强直，顽固性颅内高压，脑神经损害：视神经、面神经和听神经受损较多。 生物学特性 直接镜检形态 菌体圆或卵圆形，直径 4-6μm，芽生孢子，菌体外周有宽厚荚膜，较菌体大1~3倍，折光性强。一般染料不易着色，难以发现，称隐球菌 培养特性 沙氏或血平板, 白色至奶油色、粘稠、酵母型菌落。 新生隐球菌革兰染色结果×1000 新生隐球菌墨汁负染 微生物学检验 一、直接检查 （1）标本直接涂片：墨汁负染和革兰染色 （2）抗原检测：荚膜多糖特异性抗原（常用乳胶凝集试验检测）、半乳甘露聚糖（GM试验检测） G试验：阴性 （3）核酸检测 血清或脑脊液中阳性率可达90%，需结合临床表现分析。 二、分离培养与鉴定试验 在SDA培养基上形成酵母型菌落 酚氧化酶试验：阳性（+） L－多巴枸橼酸铁和咖啡酸培养基中，呈棕黑色菌落 脲酶试验：阳性（+） 糖同化发酵试验：不发酵糖类、 硝酸盐还原阴性、 同化葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、半乳糖、肌醇，不同化乳糖。 微生物学检验 新生隐球菌体 10×10倍 10×45倍 CSF墨汁负染色 新隐 淋巴cell 中性粒cell 荚膜 + - - 反光颗粒 + - - 芽生孢子 + - - 折光性 强 - - 大小 大 小 大 脑脊液中新生隐球菌与细胞的区别 药敏： 对二性霉素B、 氟康唑、伊曲康唑; 5-氟胞嘧啶多敏感 新生隐球菌 * * * * * * * * * 新生隐球菌的酵母型菌落 热带假丝酵母菌菌落（类酵母型菌落） 淡紫拟青霉的丝状菌落 产黄青霉的丝状菌落 黄曲霉的丝状菌落 主要致病性真菌 真菌按其侵犯部位分为： 皮肤毛发癣真菌 皮肤黏膜感染真菌 皮下组织感染真菌 侵袭感染真菌 新生隐球菌 假丝酵母菌（念珠菌） 曲霉菌 毛霉菌 马尔尼菲青霉菌 等 浅部感染真菌 皮肤癣真菌 侵犯皮肤、指甲、毛发的角蛋白组织 发癣、体癣、甲癣（灰指甲） 毛癣菌属