临床色谱质谱检验技—第三生物样品制备技术.pdf

第三章 生物样品制备 临床基因组教研室刘伟霞 邮箱：gz-liuweixia@ 2018.03.23 目 录 Contents 一. 教学要求 二. 回顾复习 三. 生物样品制备要求 四. 生物样品的的类型 五. 常用样品制备技术 六. 小结与思考 一、教学要求 教学要求  目的及目标 了解 ：生物样品制备的必要性和原则 熟悉：生物样品的类型及生物样品制备技术的临床应用及前景 掌握：常用生物样品制备技术的基本原理、操作流程及特点 为今后从事临床色谱质谱实验室检验工作打下基础。 教学要求 教学形式及学时  教学形式：理论教学  学时：2 二、回顾复习 气相色谱仪的构造 五个基本组成系统：气路系统、进样系统、分离系统、检测 系统和数据处理系统。 液相色谱仪的构造  五个基本组成系统：高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统和 数据处理系统。 如何选择合适的液相色谱柱 详细阅读色谱柱的说 物理参数 明，了解各种色谱柱 取决于分离目的 的参数和性质。 • 柱长*内径：快速分析？ 化学参数 所有组分分离？ 取决于样品性质 • 粒径：分析？制备？ • 孔径：小分子化合物？大 • 基质：高纯硅胶、聚合物； 分子化合物分析？ • 键合相：了解化合物性质， • 比表面积：并不是比表面 如极性、酸碱性、溶解性等； 积大或者小就更好，选择 • 硅胶表面性质：使用低pH 适合目的的比表面积。 值，以减少硅醇基的作用； • 碳载量：通常影响选择性； • 封端：对碱性化合物，选择 高封端的色谱柱。 三、生物样品制备要求 临床色谱质谱实验室样品分析流程 样品采集 样品制备 分析检测 数据处理 结果报告 • 医生选择检测项目 • 稀释 • HPLC 法 • Mass hunter • 数据上传信息系统 • 病人采样前准备 • 浓缩 • GC-MS法 • EZ chrom • 核对病人信息 • 采样前注意事项 • 离心 • LC-MS法 • Chem Station • 结果建议解释 • 样品保存运输 • 蛋白沉淀 • ICP-MS法 • 检查峰形 • 出具检测报告 •…… • 液液萃取 • …… • 检查曲线 • …… • 固相萃取