临床微生物-—衣原体，立克次体.ppt

* 所致疾病——恙虫病(丛林热) 临床表现: 潜伏期 （7～10d） 高热、剧烈头痛、耳聋等 红斑样皮疹、水疱、溃疡 周围红润，上覆黑色痂皮（焦痂） 免疫力 病后免疫较持久 以细胞免疫为主 * 生物学性状 形态染色 形态多样，球杆状为主，有细胞壁，革兰阴性， 不易着色常用Giemsa染色呈紫红色。 结构 与革兰阴性菌相似 细胞壁 脂多糖 粘附宿主细胞 微荚膜样黏液层 抗吞噬 * 鼠腹腔巨噬细胞中恙虫病东方体 * 巨噬细胞中恙虫病东方体（棕黄色） * * 立克次体在胞内大量生 长，胞核被压向一侧。 不同立克次体的细胞内位置： 普氏立克次体：细胞质分散存在； 恙虫病东方体：细胞质近核处成堆存在； 斑点热立克次体：细胞质内和核内生长； * 生物学性状 培养特性 细胞培养 专性细胞内寄生 鸡胚卵黄囊接种 接种动物:小鼠、豚鼠 9～12h分裂一代，最适生长温度为32～35℃ 抗原结构 与革兰阴性菌非常相似 群特异性——脂多糖 抗原 种特异性——外膜蛋白 * 生物学性状 抵抗力 较弱，56℃数30min即被灭活，节肢动物粪便中可存活一年以上，对氯霉素、四环素类敏感。 流行环节 传播媒介 节肢动物 储存宿主 寄生宿主 啮齿类动物 储存宿主 * （一）标本采集 ： 病人血液标本 活检或尸检材料 （二）标本直接检查 1．免疫荧光检测 2．核酸检测 微生物学检查 * （三）分离培养与鉴定 1．动物接种分离立克次体 豚鼠(为常用初代分离动物)、小鼠 2．鉴定 免疫荧光法鉴定感染动物脏器、鸡胚卵黄囊、细胞培养物中的特异性Ag 3.分离株繁殖与保存： 鸡胚卵黄囊培养、细胞培养 微生物学检查 * 大部分立克次体与普通变形杆菌某些菌株（X19、Xk、X2）的菌体抗原有共同的抗原成分，故可用这些变形杆菌的菌体抗原代替立克次体抗原与不同稀释度的患者血清做凝集反应，辅助诊断立克次体病。 Weil-Felix 反应（外斐反应） （四）抗体检测 1．外斐反应 结果见表。 * 流行性斑疹伤寒 4+ + - 地方性斑疹伤寒 4+ + - 恙 虫 病 - - 4+ Q 热 - - - 腺 热 - - 2+ 斑点热 4+ /+ +/4+ - Weil-Felix实验的结果分析 OX19 OX2 OXK * 2．IFA试验 3．ELISA 4．补体结合试验 5．其他：MA、IHA和LA试验等。 * 立克次体病血清学诊断方法 诊断法 最低阳性效价 (倒数) 检出抗体 时间 特点 外斐反应 160 2~3周 缺乏敏感性及特异性，抗原易得， 方法简便 IFA 16~64，Q热常≥128有现症诊断意义 2~3周 需用抗原少，群特异性，相当敏感， 能区分Ig类别 ELISA OD值0.25对照 1周 IgM捕捉作早期诊断，适用于大批 及微量标本 CF 8或16 2~3周 不如IFA或ELISA敏感，非常特异， 方法繁琐 MA ≥8 1~2周 抗原纯度要求高，不如IFA敏感， 比CF敏感 IHA 50 1~2周 很敏感，群特异性，只在感染活 动期才