临床基础检验学-—白细胞分类计数I.ppt

100倍镜，亮视野，聚光器最上，光圈调到最大，调光源 细胞形态的观察： 1、直径(大小) 2、形态 3、胞质着色,量，颗粒,空泡等内容物 4、细胞核形，颜色，染色质 5、核仁 外周血成熟白细胞的正常形态： 中性粒细胞（N）： 胞体圆形，直径10～13μm，胞浆粉红色有许多细小均匀 紫红色颗粒，胞核深紫红色杆状或分叶（1-5叶，3叶多见）， 核染色质粗糙不匀，排列紧密。 核径最窄处小于最宽处1/3为分叶核，否则为杆状 * 淋巴细胞（L）： 大淋巴：直径10-15um，胞质丰富，透明蓝色，有少量大小不 均的紫红色嗜天青颗粒，核染色质较疏松 小淋巴：成人血涂片中多见，直径6～9μm，胞浆量极少；清 澈的淡蓝色，胞核大，圆或椭圆偶见凹陷，深紫色 常偏向细胞一侧，染色质粗糙致密，可有块状 * 单核细胞（M）： 胞体圆形、椭圆或不规则形，直径12～20μm；核大，不 规则圆形、肾形、马蹄形或分叶，有时折叠扭曲。最重要的特 点是染色质较细致疏松，呈丝网状或条缕状；胞浆较多，淡蓝 或灰蓝色，毛玻璃样半透明，含有大量细小、灰尘样嗜天青颗 粒，可见空泡。 * 嗜酸性粒细胞（E）： 圆形，13-15um，胞核多为两叶，呈眼镜、八字形，核染 色质粗糙，染深紫红色，胞质着色不清，胞浆内充满，桔红 色，粗大均匀的嗜酸性颗粒，有折光性，容易破坏。 * 嗜碱性粒细胞（B）： 圆形，直径10-12um，胞浆少，呈淡红或淡紫红色，含有 大小不等，排列不规则的嗜碱性颗粒，瑞氏染色时呈蓝黑色， 常盖于核上及细胞边缘。常见胞浆中有小空泡，乃因嗜碱性颗 粒易溶于水或因功能活动而脱颗粒所致；核呈淡紫红色常看不 清，呈杆状或分叶状。 Wright染色细胞特点 细胞 胞质 胞核 百分率 中性杆状（Nst） 粉红色，有紫红色，均匀小颗粒 弯曲杆状 1-5% 中性分叶（Nsg） 多分3叶 50-70% 淋巴细胞(L) 透明蓝色 粗糙成块，无立体感 20-40% 单核细胞(M) 灰蓝色，毛玻璃样 不规则，疏松网状，有膨胀立体感 3-8% 嗜酸性粒细胞(E) 颗粒橘红色，粗大均匀分布充满胞质 多2叶，眼镜形 0.5-5% 嗜碱性粒细胞(B) 颗粒紫黑色，大小不均，杂乱排列 颗粒覆盖核不清晰 0-1% 作业： 1、结合Wright染色血涂片中所见，描绘 N（杆状和 分 叶），L、 M、E、B的细胞形态， 并简述各细胞特点和鉴别要点。 2、 简述Wright染色原理，染色步骤和影响因素。 下周实验预告 白细胞分类计数 Ⅱ * * * * * * * 襄樊职业技术学院 襄樊职业技术学院 襄樊职业技术学院 学习目标 襄樊职业技术学院 襄樊职业技术学院 参考文献 襄樊职业技术学院 襄樊职业技术学院欢迎您！ 实验 白细胞分类计数 Ⅰdifferential leukocyte count DLC 白细胞分类计数原理： 将血液制成细胞分布均匀的血涂片，Wright染 色后油镜下，根据各类细胞的形态特点和颜色差异 将白细胞区别并进行计数。通常分类100个白细胞， 计算得出各种白细胞所占的百分率。 * A、血涂片制备（blood smear） B、 Wright染色（Wright staining） C、白细胞分类计数（DLC） （瑞氏） 血涂片制备： 推片 载玻片 血液 将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度：快、大(厚)。慢、小（薄） 一张满意的血涂片应厚薄均匀 头 体 尾鲜明 涂片干燥后用铅笔在血涂片的头 部写上姓名和编号 李四 B 1 2 3 血涂片制备质量保证 载玻片：洁净，中性 、保证适当pH值，无油。 推片边缘整齐、光滑 抗凝标本，无溶血、凝块 血细胞比容与涂片关系： HCT增高 黏度较高 较小角度慢推 HCT降低 黏度较低 较大角度块推 血滴大，角度大，速度快，则血膜厚而短 血滴小，角度小，速度慢，则血膜薄而长 一、Wright染液组成： 磷酸缓冲液：pH为 6.4-6.8 Ⅱ液 溶解M+ E-，固定细胞 提高染料吸附作用 碱性亚甲蓝 M+ 又名美蓝，氯盐 Wright 染料 ME中性沉淀 酸性伊红E- 钠盐 维持弱酸环境，达到最佳染色效果 * 瑞氏染料溶于甲醇形成复合物（M+ E- ），可 离解为带正电的碱性亚甲蓝（M+）和带负电的酸性 伊红（E-）离子。细胞的染色既有物理的吸附作