临床检验仪器学-—微生物检测仪器讲稿.docx

亲爱的同学们大家下午好！!我们又见面了，还记得我吗？我来自金域检验微生物室。我叫张磊。10月和大家一起学习过离心机显微镜和生物安全柜。 今天下午接下来2节课要讲的内容是：第十章临床微生物检测仪器。 本章节需要重点掌握的内容是微生物自动化检测仪器的工作原理，也是本章的难点内容。仪器的基本结构与功能的内容要求熟悉，仪器的常见故障及维护要求了解。 第一节课先讲概述和自动血培养系统，第二节课讲自动微生物鉴定和药敏系统以及最后做一个小结。 通过第一节课的学习，希望同学们能够回答以上思考题。请同学们记录一下。5分钟时间。 微生物学自动化检测系统是随着化学、计算机学、微电子学、分子生物学、物理学等学科的飞速发展，并向微生物学渗透、交叉，应用于临床微生物的实际检测工作中，而出现的各种自动化检测系统。 那么这些自动化检测系统根据功能可分为两类：一类是自动血培养系统，一类是自动微生物鉴定及药敏分析系统。 自动血培养系统的功能是用来检测注入到这些培养瓶内的标本是否有微生物生长。标本通常是血液，当然也可以是其他无菌体液比如胸水腹水等。仪器通过自动的连续监测，能够识别因微生物生长代谢而导致的生长指数改变，随之仪器自动报警提示有细菌生长。简单来说它的功能就是检测是否有微生物生长。 自动微生物鉴定及药敏分析系统的功能是将培养基上分离到的可疑菌落制成纯的菌悬液，放入仪器中，经过仪器一系列处理最后自动得出鉴定及药敏结果。简单来说它的功能就是进行鉴定及药敏试验。 自动化血培养系统包括这五点内容，其中工作原理是需要重点掌握的内容。 现在我们开始学习自动血培养系统。自动血培养系统由计算机控制，对血培养瓶实施连续、无损伤瓶外监测。那么如何实现无损伤瓶外监测呢？我们先了解一下什么叫做有损伤，在没有自动仪器的情况下，只有这个血培养瓶，则需要使用无菌注射器穿刺把培养瓶内液体抽取出来进行显微镜观察并接种到固体培养基上来观察是否有细菌生长。这就是有损伤了。而无损伤瓶外监测就是不需要把瓶内培养液抽取出来，仪器直接在瓶外进行监测。如何实现呢？ 自动血培养仪的工作原理可以回答这个问题。首先抽取患者标本注入培养瓶中，然后放入仪器内，如果有微生物生长，会导致培养液的混浊度、PH值、CO2的浓度、荧光标记底物、代谢产物等发生改变，这些都可作为微生物生长代谢的指标。仪器通过自动监测这些指标，可以定性地检测微生物的存在。 根据检测原理也就是监测的指标不同可分为三大类：分别是以检测培养基导电性和电压力为基础的血培养系统、应用测压原理的血培养系统、采用光电原理监测的血培养系统。目前临床应用最广泛的是测压原理的系统和光电原理的系统。 检测培养基导电性和电压力为基础的血培养系统工作原理：是根据血培养基中因含有不同电解质而具有一定导电性，微生物在生长代谢的过程中可产生质子、电子和各种带电荷的原子团，使培养基的电压发生改变，通过电极检测培养基的导电性或电压的变化可判断有无微生物生长。这种血培养系统在国内非常少见。 应用测压原理的血培养系统的工作原理是：许多细菌生长过程中，常常伴有吸收气体或产生气体现象，如很多需氧菌在胰酶消化大豆肉汤中生长时，由于消耗培养瓶中的氧气，故首先表现为吸收气体。而厌氧菌生长时最初均无吸收气体现象，仅表现为产生气体（主要为CO2）。密闭的培养瓶内发生了气体的吸收或产生，会导致瓶内压力的改变，因此可利用监测培养瓶内压力的改变来检测微生物的生长情况。 目前临床常用的测压原理的系统有：VERSA TREK系统，仪器检测气体的消耗主要是O2，以及气体的产生主要是CO2、N2、H2。其特点是培养瓶顶部需要连接一个连接器，以及培养瓶内的磁力搅拌子。走下去学生中间，展示磁力搅拌子。 那么，他们是如何工作的呢？培养瓶顶部的连接装置与仪器的感压探测器相接，由探测器每12/24分钟监测培养瓶顶部气体压力变化。气体压力数据传到计算机，由计算机软件以气体压力对时间的变化绘制成生长曲线图，由此判断是否有微生物生长。有菌生长时指示灯变红。磁力搅拌子，也就是瓶内有一根小磁棒，瓶子放入仪器的瓶孔位置后，在磁场作用下磁棒会旋转起来，使培养液呈旋涡状搅动，以达到振荡培养的目的，振荡的目的是为了使标本与培养液充分混匀并通气，促进需氧菌生长。需氧瓶内有，厌氧瓶内无搅拌子。 采用光电原理监测的血培养系统：微生物在代谢过程中必然会产生终代谢产物 CO2，引起培养基 pH 及氧化还原电位改变。利用光电比色检测血培养瓶中某些代谢产物量的改变，可判断有无微生物生长。 目前临床常用的采用光电原理监测的血培养系统有：梅里埃公司的BacT/Alert系统 和BD公司的Bactec9000系列系统。今天就这两个系统举例说明它们的工作原理。 这是一台BacT/Alert系统， 先看一段这个系统工作原理的视频。 该系统在每个培养瓶底部装置一带