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厌氧手套箱 A B C 厌氧培养(初代培养) 需氧培养 厌氧培养 次代培养 厌氧菌多由内源性感染,对目前常用抗生素的敏感性较为稳定,加上厌氧菌培养条件特殊,临床试验室一般说来不做体外药敏试验。 80%N2,10%H2,10%CO2的气体条件。 厌氧菌多由内源性感染,对目前常用抗生素的敏感性较为稳定,加上厌氧菌培养条件特殊,临床试验室一般说来不做体外药敏试验。 80%N2,10%H2,10%CO2的气体条件。 微生物学检查法 分离培养及动物实验 接种血平板或庖肉培养基,镜检及生化反应鉴定 动物实验 如怀疑食物中毒,在发病后一日内,检出大于105 CFU/克食品或106CFU/克粪便可确立诊断 肉毒梭菌 1.形态染色:革兰阳性大杆菌,芽胞椭圆形位于菌体次极端,比菌体粗,呈网球拍状。无荚膜,有鞭毛。 2.培养特性:普通培养基生长,血平板上β溶血环,庖肉培养基肉渣消化,变黑,恶臭。 3.生化反应:H2S+,明胶+,葡萄糖+,乳糖-,麦芽糖+,吲哚-,卵磷脂酶 - 生物学性状 (二)临床意义 肉毒毒素--毒性最强 嗜神经性,使神经麻痹;食物中毒。 剧毒(对人致死量为0.1μg) (三)微生物学检查直接涂片镜检 ,分离培养,鉴定鉴别 艰难梭菌 (一)生物学性状: 1.形态染色:革兰阳性大杆菌,芽胞椭圆形或长方形,位于菌体次极端,无荚膜,有鞭毛。 2.培养特性:严格厌氧,血平板无溶血环,CCFA平板呈黄色菌落,在紫外灯下可见黄绿荧光。 3.生化反应:H2S-,蔗糖-,葡萄糖+,乳糖-,麦芽糖-,吲哚-,脂酶- (二)临床意义 正常菌群。医院感染的重要病原菌。产生A、B两种毒素,即肠毒素和细胞毒素,引起假膜性肠炎。 (三)微生物学检查 直接涂片镜检 ,分离培养,鉴定鉴别 艰难梭菌在CCFA平板上菌落(培养48h) 临床厌氧菌感染中最常见的病原菌 一、类杆菌属 BBE平板上有黑色晕圈 二、普雷沃菌属 KVLB出现黑色菌落 三、卟啉单胞菌属 四、梭杆菌属 革兰阴性无芽胞厌氧杆菌 革兰阳性无芽胞厌氧杆菌 革兰阳性无芽胞厌氧杆菌有6个属,几十个菌种,临床常见的有丙酸杆菌、优杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌、蛛网菌和放线菌。 它们多是人和动物皮肤、口腔、肠道等部位的重要生理菌群,在体内起到调节和维持人体微生态平衡的重要作用。 它们的菌落、生化反应、菌体形态等都很相似,鉴定较难。应用气液相色谱法(GLC),根据其代谢产物不同,可对菌属做出初步判定。 厌氧性球菌(Anaerobic cocci)是临床厌氧感染的重要病原菌,约占临床厌氧菌分离株的25% 主要包括革兰阳性: 消化球菌属 消化链球菌属 革兰阴性: 韦荣球菌属 厌氧球菌 消化球菌属 黑色消化球菌(Peptococcus niger)是消化球菌属中唯一的菌种。 革兰阳性球菌。直径0.3~1.3μm,单个、成双、短链或成堆排列。无芽胞,无荚膜。专性厌氧菌,生长缓慢,厌氧培养2~4天形成黑色不溶血的小菌落。 标本黑色有臭味是该细菌感染的重要特点。 消化链球菌属 代表菌为厌氧消化链球菌(P.anaerobius) 革兰阳性球形或卵圆形,大小不等,菌体直径0.3~1μm,常成双或呈短链状排列。无鞭毛,无芽胞,无荚膜。 消化链球菌培养特性 专性厌氧,营养要求较高,需羊血和血清培养基才能生长。在厌氧血平板上,菌落直径0.5~1mm、灰白色、凸起、不透明、边缘整齐,一般不溶血,偶有α或β溶血。 生化反应不活泼,在硫乙醇 酸钠液体培养基中,呈颗粒 状沉淀生长。在其平板上生 化反应较为明显,吐温-80可 促进其生长。 韦荣球菌属 韦荣球菌属细菌形态相似,为革兰阴性球菌。直径0.3~0.5μm,多排列成对、近似奈瑟球菌。无鞭毛、无芽胞。 专性厌氧,血琼脂平板上生长良好,培养48h 后,形成直径1~2mm圆形、凸起、灰白色或黄色混浊、不溶血菌落;在硫乙醇酸盐肉汤中混浊生长,产生小气泡。 新鲜培养物立即置紫外线下照射,菌落可显红色荧光,接触空气后荧光消失。 生化反应不活泼,不分解糖类,还原硝酸盐。 革兰阴性无芽胞厌氧杆菌 这是一群不形成芽胞的厌氧杆菌,是人体正常菌群的重要组成成员,部分菌株可作为条件致病菌引起感染。 常见菌属有:类杆菌属 普雷沃菌属 卟啉(紫)单胞菌属 梭杆菌属 类杆菌属 类杆菌属(Bacteroides)是临床上最重要的革兰阴性无芽胞厌氧杆菌,临床标本中以脆弱类杆菌(B.fragilis
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