临床免疫学—超敏反应（检测篇）.ppt

C1q固相法 * C1q固相法敏感性高，达0.1 mg/LHAHG，重复性好 C1q制品不易精制，且纯品不稳定 尚需注意的是，待检血清需先56℃30min处理，以灭活其中的补体和破坏已与CIC结合的C1q，空出补体结合点。 * mRF固相抑制试验 固相mRF + 血清标本 同位素标记的热聚合IgG 固相中放射性与CIC的含量呈负相关 本法敏感性较高，但mRF来源困难，操作费时，难于常规应用 * Raji细胞试验 固相Raji细胞 + 标本 离心沉淀 荧光标记抗人IgG或同位素标记抗人IgG 测沉淀细胞的放射活性 方法简单、敏感性高、特异性强，但易受血清游离IgG影响，且Raji细胞 培养较困难。 * Ⅳ型超敏反应的免疫学检验 结核菌素皮肤试验：了解个体细胞免疫功能状况。 斑贴试验：用于寻找引起接触性皮炎的过敏原 * 超敏反应（检测篇） 广州医科大学金域检验学院 徐霞 * I型超敏反应的免疫学检验 ◆体内试验 皮肤试验（皮内、挑刺） 肥大细胞活性+IgE（肥大细胞结合的） ◆激发试验 支气管激发试验 器官反应性+肥大细胞活性+ IgE ◆体外试验 IgE测定（总IgE、特异性IgE）、吸入物变应原过筛试验 、相关细胞及其它因素测定 没有一种单一的试验能保证其结果的准确，体内和体外试验互为补充，以得到准确的特异性诊断。 * 皮肤试验 皮内试验（intracutaneous test） 是我国目前应用最广泛的一种试验方法 将试验用变应原提取液和对照液各0.02ml分别用皮试针头注入皮内，使局部形成直径2～3mm的圆形皮丘。反应须观察15～20分钟，根据风团、红晕大小判定结果。 * 皮内试验的分级标准 分级 风团直径 红晕直径 ― ＜5 ＜5 + 5～10 10～20 ++ 10～15 20～30 +++ 15～20 30～40 ++++ 20以上 40以上 风团的直径是分级的主要依据，红晕大小仅做参考；风团若有伪足，其结果判定可向上调一级，但最多为（++++）级。 * 皮肤点刺试验 ◆ 将变应原和对照液分别滴于试验部位皮肤（前臂掌侧） ◆用点刺针垂直刺入皮肤表层，以刺破皮肤而不出血为度。15分钟后观察结果。 ◆安全、易于操作、临床相关性好，推荐为最佳皮肤试验方法 ◆阳性反应：红斑 * 皮肤试验 应用：◆寻找变应原◆预防药物或疫苗过敏 评价：属于活体内试验 能反映机体各种因素综合作用的实际免疫状况 操作简便，结果可信度大 注意：若已知对某种物质高度过敏，则不宜再做皮试；身体虚弱、哮喘发作期及不合作的儿童也不宜做皮试。皮试时应配备常规的抢救药品和设施。 * 支气管激发试验 非特异性激发试验：测定气道反应性 试验前测定FEV-1和肺活量，吸入非特异刺激物（组胺或甲基胆碱）15～20min后复查FEV-1 阳性结果判定：明显的自觉症壮（胸部紧迫感和喘息等）；肺部闻及哮鸣音；FEV-1下降20%以上。 变应原激发试验 方法同上，吸入浓度倍增的变应原溶液 * 应用 了解支气管的反应性 确定支气管哮喘的变应原 检验新制剂的抗原性 评价平喘药疗效 观察脱敏治疗的效果。本法的缺点是每次只能测试一种抗原，要求有一定专门设备和技术，并需取得病人的配合。 * 评价 激发试验是最可靠的特异性诊断方法，但有一定危险性。 特异性高，与患者病史、症状和RAST相关性强 每次只能测试一种抗原，需专门的设备和技术 试验前需停用茶碱类、β-受体激动剂、抗组胺药和皮质激素 *  血清IgE的检测 总IgE测定 方法：双抗体夹心法、放射免疫吸附剂试验（RIST）、ELISA、化学发光法等 影响总IgE水平的因素：年龄、性别、种族、寄生虫感染等 总IgE水平高不一定是过敏 过敏者总IgE水平不一定高 * 特异性IgE测定 特异性IgE（Spec