临床免疫学—免疫.docx

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何谓抗原抗体反应?其原理是什么? 抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。 原理:空间互补关系、相互作用力、亲水胶体转化为疏水胶体 抗原表位与抗体超变区分子之间的结构互补性与亲和性 抗原表位与抗体超变区密切接触 高度互补使抗原抗体之间有足够的结合力(包括疏水作用力、氢键结合力、静电引力、范德华力) 亲水胶体转化为疏水胶体 抗原抗体的结合力有哪些? 疏水作用力、氢键结合力、静电引力、范德华力 抗原抗体反应有哪些特点? 特异性、可逆性、比例性、阶段性 如何理解抗原抗体反应的特异性和交叉反应? 特异性:1)抗原分子,只能与由它刺激所产生的抗体结合而起反应的专一性能。 抗体的抗原结合部位由抗体分子的VH和VL上各自具有三个超变区组成,该部位形成一个与抗原表位互补的沟槽,决定了抗体的特异性。 交叉反应:两种不同的抗原物质具有部分相同或类似结构的抗原表位,则可与彼此相应的抗体反应。交叉反应仍是抗原抗体的特异性反应。 什么是抗原抗体反应的可逆性?有何应用? 是指抗原与抗体结合成复合物后,在一定条件下可解离为游离的抗原和抗体的特性。 应用:常用于纯化抗原或抗体的亲和层析法 如何理解抗原抗体反应的亲和力和亲合力? 亲和力:抗体分子上一个抗原结合部位与对应的抗原表位之间的结合强度,取决于两者空间构型互补的程度,是抗原抗体间固有的结合力。 亲合力:是指一个抗体分子与抗原分子表面数个相应抗原表位之间的结合强度,亲合力与抗体结合价相关(多价优势) 抗原抗体反应体系中为何要确定抗原、抗体的最适比例? 因为天然抗原大多数是多价的,而抗体大多为二价; 当抗原与抗体在等价结合时,抗体分子的两个Fab段可分别与2个抗原分子表面的抗原表位结合。相互交叉连接成立体的巨大网格状聚集体,形成肉眼可见的成淀物。 当抗原或抗体过量时,由于过量方的结合价不能得到饱和,只能形成较小的成淀物或可溶性抗原抗体复合物。 因此在检测抗原或抗体时,应注意调整反应体系中抗原与抗体的比例,以避免带现象的干扰而导致阴性结果。 抗原抗体反应有哪些影响因素? 反应物自身因素:包括抗原理化性状、表位种类和数目,抗体的来源、特异性、亲和性、效价 反应的环境因素:适合电解质浓度、适合的酸碱度(ph6-8)、适合的温度 抗原和半抗原的区别? 抗原指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞,并能与相应的抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质,包括细胞、蛋白质、核酸、多糖、脂类等 半抗原:指的是抗原只具有免疫反应性而不具有免疫原性。 制备可溶性抗原的常用方法? 凝胶过滤法、离子交换层析法和亲和层析法有何联系和区别? 联系:都是可溶性抗原(蛋白质)纯化的方法 区别:凝胶过滤法是根据分子量的大小进行分配的、离子交换层析法是根据蛋白质携带的电荷不同进性的分类、亲和层析发是根据亲和力的不同而分的类 提高半抗原的免疫原性的方法有哪些? 添加佐剂、基因工程 纯化抗原的鉴定包括哪些? 蛋白质的含量测定、分子量的测定、纯度的鉴定、免疫活性的鉴定 什么是免疫佐剂?免疫佐剂有哪些分类?免疫佐剂的作用机制? 免疫佐剂:指预先或与抗原同时注入体内,可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质称为免疫佐剂 分类:具有免疫活性的佐剂:细胞因子、微生物及其代谢产物 无免疫原性的佐剂:石蜡、羊毛脂、明矾、矿物油、脂质体、多聚肌酸:胞苷酸 作用机制:1)改变物理性状,延缓其被降解和清除速率,从而更有效刺激免疫系统 刺激单核-吞噬细胞系统,增强其处理和提呈抗原的能力 刺激淋巴细胞的增殖与分化 常用于细胞破碎的方法有哪些? 超声破碎法、反复冻融法、酶处理法、表面活性剂处理法 何谓佐剂?主要作用机制有哪些?福氏佐剂的组成? 佐剂是指预先或与抗原一起注射于机体,能够增强机体免疫应答或改变免疫应答类型的物质。 作用机制:1)改变抗原的物理性状,延缓抗原降解和排除,从而延长抗原在体内的滞留时间,避免频繁注射从而更有效的刺激免疫系统,有利于高亲和力抗体的产生。 刺激单核-吞噬细胞系统,增强其处理和提呈抗原的能力 刺激淋巴细胞增殖和分化,可提高抗体初次和再次应答的抗体滴度 改变抗体的产生类型以及产生迟发型变态反应 福氏佐剂的组成:液体石蜡、羊毛脂及卡介苗混合而成 什么是抗血清?制备的基本流程?单价特异性抗血清? 何谓单克隆抗体?有何特性?杂交瘤技术的基本原理? 单克隆抗体:只针对抗原的单一表位的B淋巴细胞克隆产生的同源抗体 特性:高度特异性、高度均一性、弱凝集反应和不呈现沉淀反应、对环境敏感 基本原理:能够产生单一抗体的B淋巴细胞与能够在体外无限繁殖的骨髓瘤细胞的融合 为什么在HAT培养基上只有杂交瘤细胞能够存活? HAT培养基中有三种关键成分是次黄嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶 叶酸是DNA主要合成途径的组分,而氨基蝶呤是叶酸的拮

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