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输血科知识培训XXX人民医院检验科XXX 一 复习:有关血型的简单知识与概念血型是人体血液的一种遗传性状,各种血液成分包括红细胞、白细胞、 血小板及某种血浆蛋白在个体之间均具有抗原成分的差异,受独特的 遗传基因控制。由若干个相互关联的抗原抗体组成的血型体系,称为血型系统。血型被认为是指各种血液成分的遗传多态性标记。“免疫血液学”在临床医学、人类学、遗传学、法医学、考古学等方面的应用日趋广泛, 尤其是在输血、器官移植、骨髓移植等临床实践中发挥着重要作用。 人类最重要的几个血型系统红细胞血型系统 ABO血型系统 Rh血型系统其他血型系统 白细胞抗原系统 血小板抗原及抗体 血清蛋白成分的抗原特异性血型抗原与抗体的几个特性A或B抗原在胚胎期及出生时便能检出,但敏感性较低,到20岁左右时 才达高峰。抗原性终身不变,但到老年敏感性有所下降。ABO血型系统抗体有免疫抗体和天然抗体之分。 抗体有抗A和抗B两种。 人在出生前尚未产生抗体,出生后3-6个月才开始出现,至青春期达高 峰。产生抗体的功能可延续终身,但其效价随着年龄增长而逐渐降低。 天然抗体可能是由一种无觉察的抗原刺激而产生。 血型抗体是免疫球蛋白,免疫性抗体主要是IgG,天然抗体主要是IgM。ABO血型分型原则血型红细胞上抗原血清中抗体AA抗BBB抗A O无抗A,抗BABA、B无血型鉴定前的准备 一、标本的采集 1.红细胞悬液标本 门诊血型常用手指血做正定性。但现在已经不提倡了。采集EDTA-K2抗凝的静脉血离心,取红细胞用生理盐水洗涤配制红细胞悬液:2%红细胞悬液用于抗体效价的测定; 5 %红细胞悬液用于血型鉴定、交叉配血试验, 2.血浆或血清标本血型及配血标本的要求护士根据送检单的要求,双人核对采集标本。采集后立即送检。输血科工作人员注意核对接收标本两个小时内要完成血型的检验。配血标本要三天内的。标本要保存七天。ABO血型鉴定方法血型鉴定抗原+抗体反应正向定型(direct typing): 已知特异性抗体(标准血清) 检测红细胞上的未知抗原 反向定型(indirect typing): 已知血型的标准红细胞 检测血清中的未知抗体 ABO血型正、反向鉴定及结果判断 鉴定ABO血型常用方法 1. 生理盐水凝集法 盐水介质原理:Ag+Ab AgAb用生理盐水为介质,检测的是IgM性质抗体 玻片法试管法正定型血型鉴定操作程序图(玻片法)血型鉴定试管法1、每个被检者准备小试管1支,贴好名签,加入等渗盐水1ml。从毛细血管采血配成5%的红细胞悬液,注意血液不能凝结。2、每个被检者准备小试管3支,分别贴上A、B标签,并标上姓名,按标签分别加抗A、B抗体2滴。3、两管各加被检红细胞悬液1滴混匀。4、放在离心机内,用1000~3000转/分,1分钟,观察现象。加被检红细胞悬液加试剂抗体血清离心相对应的抗原抗体反应观察结果镜下的凝集与非凝集反向定型一、用途:当没有合适的标准血清,或用标准血清鉴定出现可疑结果时,可用此法核对。二、标准红细胞悬液的配置:分别取已知敏感性高的标准A、B、0、三型 人的红细胞红洗涤三次,配成5%的红细胞悬液(若无标准红细胞,可用5个A型,2个B型,2个O型人红细胞,分别按型混合,代作已知标准红细胞)三、方法1、从被检者静脉,制成血清或血浆。2、试管的准备,同标准血清鉴定法3、在A管放标准A型红细胞1滴,B管放标准B型红细胞1滴,在O型管放标准o型红细胞1滴。4、各加被检血清2滴,分别混匀,离心后判断结果同前。ABO血型正、反向鉴定及结果判断已知A型红细胞+被检者血清已知A型血清+被检得红细胞问题 在特殊环境,没有标准血清和标准红细胞,仅知一个A型(或B型)人时,若用血液,怎么来鉴定人的血型?2.微柱凝胶技术微柱凝胶技术是液相技术与固相技术的巧妙组合,是凝胶过滤技术、离心技术、红细胞凝集试验技术(特异性抗体抗原反应)的完美结合。通过对凝胶种类的选择和凝胶浓度的调节来控制分子筛孔径大小,使分子筛只允许游离红细胞通过,从而达到分辩凝集红细胞和非凝集红细胞的目的。微柱凝胶技术是目前最易大规模推广、最适于常规试验的最好血型血清学试验技术。微柱凝胶技术原理当抗原抗体反应时红细胞发生凝集(包括已致敏的红细胞通过抗人球蛋白的桥连作用发生的凝集),在一定的离心力作用下,凝集的红细胞不能通过凝胶间隙而留在凝胶分离柱上层或分散在凝胶分离柱中,此为阳性反应;而未凝集的红细胞在离心力的作用下可通过凝胶间隙而沉积于凝胶分离柱的底部,此为阴性反应。微柱凝胶种类(一)中性胶(又称空白胶,仅含有葡聚糖凝胶):用做检测IgM抗体与相应抗原红细胞的反应。如ABO反定型。(二)特异性胶(如加入过抗-A、抗-B、抗-D等特异性抗体的凝胶):利用包被的
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