鸡胚尿囊绒毛膜移.pptxVIP

鸡胚尿囊绒毛膜移植 ; 把从正常环境分离的胚胎或其它组织移植到鸡胚的尿囊绒毛膜（CAM）上，使其在尿囊绒毛膜上继续生长和分化，是分析发育的一种研究方法。如 Mary Rawles（1952）把早期胚胎的囊胚层仔细地分成一定部分，放在 CAM上生长，再把移植体制成切片，检查它们的组织来确定移植体中的组织类型，根据实验结果就能把囊胚层各部分发育的潜能编成表。Weiss和Taylor（1960）应用CAM移植法去解答胚胎单个细胞的行为和相互作用。从较大的鸡胚（孵育8-14天）器官中分离出细胞，离心细胞悬液使其聚集成团，然后再移植到CAM上。在CAM上进一步发育以后，把聚集的组织制成切片，发现它们又构成原来器官的组织特点。例如，中肾聚集体发育成正常的肾小管，皮肤聚集体产生羽毛。因此证明了已进入分化阶段的器官所分; 离的细胞仍然具有一种潜能，能再聚集并再构成正常的组织。发育生物学上还有许多研究涉及到CAM移植，甚至已证实从蛙到人的各种组织都能在鸡的CAM上生长。但是这种技术与体外培养方法相比有些不同，体外培养必须在严格控制的条件下进行，而在CAM移植上，对研究的组织所提供的环境是不能精确确定的，随着胚胎（宿主）发育，胚胎循环中的一些物质如激素会进入CAM上而影响移植体的发育。然而CAM移植技术比体外组织培养技术要容易的多，不需要那么复杂的准备工作。这个胚外位置对研究的组织进一步发育提供了非常有利的环境，胚外液体是合适的“培养基”。如果移植块在CAM上成功生长的话，CAM上的血管将会长入移植体，为它提供氧气和营养物，同时带走代谢废物。 ; 实验步骤 ;实验步骤;实验步骤;实验步骤;实验观察 ;实验观察;48小时的鸡胚发育观察;鸡胚发育的观察;实验准备;实验技术;孵育;1. 孵蛋箱结构及使用方法;2. 受精蛋的选择和保存;3. 孵育前蛋的消毒及升温处理; 4. 孵育的日常管理;孵育的日常管理;孵育的日常管理;鸡胚在孵育过程中的发育;鸡胚在孵育过程中的发育;第一天：?状区经过24小时的孵育，胚盘变大变厚，明区和暗区同时增大，在卵黄上可见到椭圆形的盾称为胚盾，是未来的胚区。 ;第二天：胚盘已扩展一倍并被红色的血管围成樱桃???或椭圆形，这些血管即胚胎的卵黄囊循环的边缘血管----缘窦。胚盘中心有一变曲的透明体----胚胎，透明体中可见一搏动着的小红点，即原始心脏。 ;第四天：?卵黄体积继续增大，颜色变淡，卵黄囊血管包围卵黄近1/3，由于卵黄液化膨胀的压力，使卵黄囊血管紧贴于内壳膜，可与外界进行气体交换。照蛋时卵黄不易转动，胚与卵黄囊血管形似蜘蛛，俗称“小蜘蛛”。尿囊是一个很小的水泡，眼睛开始沉积黑色素。 ;第六天：尿囊增长迅速，一天之内增长了约4倍，尿囊血管系统迅速发育，已经覆盖羊膜与部分卵黄，但较卵黄囊血管细；卵黄囊血管分布在卵黄面积达2/3以上。胚体已初具翼和腿的外型，已眼睛黑色素更多，照蛋可见头部与躯干部两个小圆团，俗称“双珠”。 ;第八天： 尿囊较第7天扩大了一倍，几乎包围了卵黄囊。从第4天到第8天是尿囊发育的第一阶段，胚胎由卵黄囊呼吸转化为尿囊呼吸。胎儿外形发育趋于完善，上喙白色，破壳齿明显可见，胸腹腔尚未封闭，心、肝、胃都暴露于体腔外。羊水与尿囊液迅速增多。 ;第十天：尿囊在胚胎的背面迅速向下端发展，将蛋白逐渐包围起来。当孵化的第10天结束时，尿囊虽向小端逐渐包围，但尚未合拢。羽毛原基遍及全身，翼和腿部羽毛的尖端已微露。胎儿的位置靠近气室。 ;第十二天：图中尿囊在蛋白端尚有一小孔未合拢，对于12天的胚胎发育似乎嫌慢。由于个体差异，这种情形并不罕见，鸡胚短羽已遍与爪已角质化。蛋白呈淡黄褐色，粘稠，浆羊膜道形成。 ;第十四天：尿囊血管充分发育并紧贴壳膜，通过内外壳膜、蛋壳排出二氧化碳和水蒸气，吸进氧气；尿囊液增加，主要集中于羊膜周围，新陈代谢旺盛，胎儿增重迅速06-06-30蛋时尿囊血管很容易破裂。 ;第十六天：尿囊所包围的蛋白进一小减少，尿囊液颜色变混，有少量尿酸盐积由于吞食白、胚胎代谢产物增多，排泄的尿酸盐贮存在尿囊中。 胎儿体重继续增大，羽毛加长变丰，颈部羽毛长度达15毫米。 ;第十八天：?残存的蛋白羊水被吞食完毕，尿囊液减少，气室增大，尿囊增厚并收缩，整个胚胎较易与蛋壳膜剥离，可见到两面三处尿酸盐沉淀。 ? 由于蛋白利用较好，胎儿的羽毛像缎子一样覆盖在鸡体表面。此后胎儿的营养来源只有一种----卵黄。 ;第十九天：气室继续扩大，尿囊液与羊水继续减少，快活酸盐沉积增加，尿囊血管鲜红，表明尿囊仍司呼吸器官的职能。孵化第19天在气室中可见展翅，少数雏鸡的喙已穿破内壳膜而达于气室。可听到雏鸡的鸣叫声。 雏鸡的营养全靠卵黄，部分卵黄已收入腹腔，一旦雏鸡的喙的喙进入气入气室，即开始肺的呼吸，此时雏鸡尿囊和肺的呼吸并存，并逐渐由前