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骨髓细胞微核实验;微核试验是用于染色体损伤和干扰细胞有丝分裂的化学毒物的快速检测方法。
微核(Micronucleus,MCN)是指细胞中主核之外的颗粒,染色与细胞核一致,相当于细胞直径的1/20-1/5,呈圆形或杏仁状。是细胞内染色体断裂或纺锤丝受影响而在细胞有丝分裂时滞留在细胞核外的遗传物质。;机理:
1 有丝分裂毒物的作用使个别染色体或带着丝点的染色体环和断片在细胞分裂后期被滞留在细胞质中
2 断片或无着丝点染色体在细胞分裂后期不能定向移动,从而遗留在细胞质中
结论:
微核试验能检测化学或其他物质因素诱导产生的染色体完整性改变和染色体分离改变这两种遗传学终点
;;红细胞的分化成熟过程;;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的形成;8;9;10;11;Giemsa染色;实验目的;【Animal】
小鼠是微核试验的常规动物,通常用7~12周龄,体重18~20g的小鼠。
【Reagents 】 小牛血清
Giemsa染液
环磷酰胺
;实验分组和染毒方法;;推 片 方 法;观察与计数:低倍镜下选择分布均匀,染色较好的区域
油镜下观察计数
多染红细胞(PCE)呈灰蓝色,正染红细胞(NCE)呈橘黄色。典型的微核多为单个、圆形、边缘光滑整齐,嗜色性与核质一致,呈紫红色或蓝紫色 。
计数1000个PCE中含微核的PCE数,并且计数200个细胞中PCE与NCE的比值。;实验结果;结果分析与评价;Thank You !
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