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试剂 浓度 时间 二甲苯 30min 二甲苯 45min 二甲苯 60min 石蜡 30min 石蜡 1h 石蜡 1h 二、全密闭程序控制自动组织脱水机 4、全密闭式程序控制自动组织脱水机液体的更换规律及原则 理论上讲每次更换液体应该将脱水机内的液体全部更换。 (1)一般固定液每周更换一次。若组织块较多(每天200~300块),固定液没三天更换一次。 (2)脱水剂梯度酒精每周更换一次(150块/天,如果每天处理300块左右,应该3天更换一次乙醇)。方法是将第2缸的80%乙醇倒弃,95%乙醇及无水乙醇依次迁移。 (3)透明二甲苯10~15天更换一次,二甲苯第一缸倒弃,第二缸前移。 (4)石蜡必须干净无杂质。建议1500~2000块将第一缸石蜡废弃。 二、全密闭程序控制自动组织脱水机 5、全密闭式程序控制自动组织脱水机液体的操作方法 从取材室与取材医师完成标本核对后,将组织拿至脱水机,此刻脱水机界面如下图所示 1.确认清洗程序完成,打开处理槽盖。 2.擦净槽盖面及槽内水气,槽内残渣。 3.将脱水栏按顺序平稳放好,盖紧槽盖、确认锁定。 4.选择层数(level)、选择并确认使用的程序(Progress Select) ,立即开始(Immediate Start )处理组织。 5.脱水程序处理完成,按(drain all chamber)将处理槽内的石蜡排空。 6.打开处理槽盖,取出脱水栏,将槽内残蜡擦拭干净。 7.盖好处理槽盖,按(flush start)清洗,整个处理程序完成。 二、全密闭程序控制自动组织脱水机 备注: 1.如果脱水过程中,有需要继续添加的组织,选择Lid Release键,然后将盖子打开,将组织放入脱水机,然后按屏幕上Restart所对应的按键即可 2.每次脱水完成前、后都应擦拭反应缸,脱水完成后,取出组织,应将组织篮放入反应缸中运行冲洗程序,以脱去反应缸及其组织篮中的石蜡以方便取材。 3.应定期检测石蜡液面,正常情况下每周检测一次,如一段时间内标本过多或者过少,可以适当减少或者增加检测周期,防止出现石蜡液面不够的情况。 4.脱水机需要定期擦拭保养,并填写设备维护保养记录。 三、组织包埋制作技术 包埋的定义:组织块经过固定、脱水、透明剂(石蜡、火胶棉、树脂、塑料等)浸透,用包埋剂(石蜡、火胶棉、树脂、塑料等)包成块的过程称为包埋。 常用包埋方法:石蜡包埋法、火胶棉包埋法、树脂包埋法、塑料包埋法、快速包埋法、液体标本包埋法 组织包埋的发展及现状:手工包埋、半自动组织包埋熔蜡器、全自动组织包埋、冷台一体机 最常用的包埋石蜡熔点为56~58℃、58~60℃ 三、组织包埋制作技术 全自动组织包埋、冷台一体机 三大组成部分:1.石蜡缸及出蜡口;2.左右储存槽(100~120块);3.工作台面以及镊子加热孔 功能:温度调节(65~70℃)、时钟调节(24h)、工作时间设定(每周的工作日期)、开关机时间设定(6~10:30)、冷台装置(0~-15℃)、流量控制。 维护与保养:选择质量好的切片石蜡,注意定期清理熔蜡储槽,并加入少许二甲苯清洗管道,以保证石蜡流出畅通,并在每日工作完成后清洗机器外貌。散热孔要经常清理。 三、组织包埋制作技术 石蜡包埋法及质量控制 1.包埋时要核对组织块与标本盒的标记是否一致(黄盒x几)。 2.严禁污染及交叉污染(随时纱布擦拭台面)。 3.根据组织的大小选择不同的包埋模具。 4.根据组织的不同结构层次、特点、标记面,包埋时应加以注意,如食管黏膜或标注立埋的则需要立(垂直)埋。 5.皮肤组织包埋时应将组织块45°倾斜放入石蜡中包埋,2块及以上组织并列倾斜包埋。 6.食管黏膜、胃肠类黏膜视黏膜组织大小、长短、厚薄,或90°垂直包埋,或卷曲包埋。 7.肾、肝、前列腺、乳腺等穿刺标本视组织大小,包埋时平整的放入石蜡中,轻轻按平,切片时才能切全,用力过重会使组织破碎,过轻会使组织包埋不平,切片不完整。 三、组织包埋制作技术 8.对宫颈1~12点锥切标本应按组织的内膜面至浆膜面成90°放入石蜡中包埋。 9.内镜下进行的食管早期肿瘤微创手术切除的黏膜标本,要按照一个方向的切面或特殊标记进行包埋。 组织包埋应注意的问题: 1.包埋注意核对内容; 2.防止组织污染 随时清洁工作台面,加热包埋镊,注意脱水盖有无组织存留; 3.灌蜡适量,不可过多或过少,防止多余蜡边形成; 4.修蜡块及包埋机的维护及保养 四、石蜡组织切片制作技术 病理组织经取材、固定、脱水处理,用石蜡包埋后制作成蜡块,用切片机制作切片的过程称作为石蜡组织切片。一般切片的厚度为3~5um。 捞片机内置蒸馏水,水温设置在45℃左右,有利于石蜡切片蜡带的铺平、伸展。 捞片位置要适当,组织面要放在载玻片下2/3
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