D202-V1-Blood Direct PCR Kit,血液直接PCR Kit(高保真酶),新贝生物,NovaBio,新贝(上海)生物科技有限公司,免费技术咨询,专注分子生物学工具酶和服务.pdf
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NovaBio
Blood Direct PCR Kit
货 号:D202
保存条件: -20℃
产品介绍:
Blood Direct PCR Kit里的G5 DNA Polymerase经过了定向蛋白工程改造,对全血中的抑制物有极强的耐受性,且为高保
真酶扩增产物可用于DNA克隆实验。可直接扩增的血液样本包括:新鲜血液、4℃血液、干血渍,且兼容常规的抗凝剂
(EDTA、柠檬酸钠、肝素等)。试剂盒包含扩增脊椎动物SOX21基因上游高度保守区域的引物。
产品组成:
组分 D202-01 (100次) D202-02 (500次)
2 × G5 Blood PCR Mix 1 mL 5 mL
Positive Primer F (10 μM) 50 μL 50 μL
Positive Primer R (10 μM) 50 μL 50 μL
※Positive Primer F序列:AGCCCTTGGGGASTTGAATTGCTG(Tm:68℃) ;
Positive Primer R序列:GCACTCCAGAGGACAGCRGTGTCAATA(Tm:69℃) ;产物长度237bp 。
产品使用:
A.推荐体系
2 × G5 Blood PCR Mix完全解冻后,颠倒混匀,配置如下反应体系:
DNase free H2O 补足至 20 μLa
上游引物(10 μM) 1 μL
下游引物(10 μM) 1 μL
血液 1-2 μLb
2 × G5 Blood PCR Mix 10 μL
注:a.可以等比例缩放反应体系体积,但不要小于10 μL;b.加入模板量不要超过体系的1/10体积。
B. 推荐反应程序
95 ℃ 5 分钟
95 ℃ 15 秒
Y* ℃ 15 秒 25-35 循环数
72 ℃ 30-60 秒/kb
4 ℃ 保存
* 退火温度一般为在Tm ± 5℃之间尝试,无产物或者产物少降低退火温度,有非特异性产物提高退火温度。
C.电泳
PCR产物4000rpm离心1分钟,取上清电泳(加过度血液模板,PCR产物呈果冻状,离心利于吸取上清电泳)。
Version1.3 本品仅供科研使用,不能用于人和动物医疗诊断 Page 1/1
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