Q205-V1-2×S6 Probe qPCR Mix,探针法qPCR Mix,新贝生物,NovaBio,新贝(上海)生物科技有限公司,免费技术咨询,专注分子生物学工具酶和服务.pdf
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NovaBio
2×S6 Probe qPCR Mix
货 号:Q205
保存条件:- 20 ℃避光储存
产品介绍:
本品为探针法qPCR预混液。该预混液包含qPCR所需的酶、dNTP 、缓冲液等组分,使用时只需加入模板、引物、水即可,简
便易用。其中本品所使用的聚合酶采用了国际领先的配体热启动技术,较之抗体封闭、化学修饰等热启动方式具有封闭效率
高,酶活释放快的优势。搭配针对qPCR精心优化的缓冲体系,该预混液具有灵敏度高,特异性强的特点。
产品组成:
组分 Q205-01 Q205-02
2 × S6 Probe qPCR Mix 4 x 1.25 mL 8 x 1.25 mL
50 × ROX Reference Dye 1* 200 μL 400 μL
50 × ROX Reference Dye 2* 200 μL 400 μL
注:ROX1适用机型:ABI 5700/7000/7300/7700/7900/7900HT/7900HT fast/stepone/stepone plus 。
ROX2适用机型:ABI 7500/7500 Fast/ViiA 7/QuantStudio 3/QuantStudio 5 ;Stratagene MX3000P/MX3005P/MX4000P。
无需添加ROX机型:Roche,Bio-Rad ,Eppendorf,Illumina的仪器。
产品使用:
A.推荐反应体系
在RNase-free 管中配置如下体系:
2 × S6 Probe qPCR Mix 10 μL
Primer-F (10 μM) 0.4 μL
Primer-R (10 μM) 0.4 μL
Probe (10 μM) 0.2 μL
Template x μL
50 × ROX Reference Dye * 0.4 μL
RNase-free ddH O 补足至 20 μL
2
注:a.引物和模板使用量请根据需要调整,引物的终浓度范围在0.1-1 μM ,通常引物的使用量增加可以提高灵敏度(Ct减小)但同时会降低特异性(出现引物二聚
体等非特异性产物)。
b.请根据仪器选择相应ROX。
c.探针终浓度在0.05-0.25 μM调整。
d.未稀释的cDNA的加入量不应超过总反应体积的1/10
B.推荐反应程序
阶段 温度 时间 循环数
预变性 95℃ 30 s 1
变性 95℃ 10 s
40-45
退火延伸 60℃
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