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北京大学化学学院中级仪器实验室 A1R 操作说明书
激光扫描共聚焦显微镜
(A1R-si)
操 作 指 南
北京大学化学学院中级仪器实验室 A1R 操作说明书
目 录
? 第一章:Ti-E 显微镜操作 2-7
? 显微镜光路调节和照明注意事项 6
? Ti-E 物镜,DIC 插片,DIC 棱镜对照表 7
? 第二章:共聚焦开关机 8-10
? 第三章:共聚焦图像拍摄11-38
? NIS-Elements C 软件开启和操作界面简介11-15
? NIS-Elements C 的实时图像获得基本操作 16-23
? 图像拍摄 24-27
? 探测模式(标准探测器)设置 28-38
? 第四章: 图像的保存和查看 39-42
? 第五章:图像分析 43-46
? 附件一、多维拍摄功能和操作方式介绍 47-51
? 附件二:图像格式批量转换操作 52-53
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北京大学化学学院中级仪器实验室 A1R 操作说明书
第一章 Ti-E 显微镜操作指南
(一) 认识显微镜各个部件
(1)滤光片:包括 D---毛玻璃;NCB---色温 (8)滤色块转盘(包括 DIC 检偏器);
平衡片;ND---减光片;“GIF”---绿色滤 (9)手动荧光光闸;
光片和用于 PFS 的红外滤光片; (10) 电动焦距调节旋钮;
(2)视场光阑; (11) ND 减光片;
(3)聚光器升降旋钮; (12) 遥控器;
(4)起偏器(DIC 用); (13) 透射光电源;
(5)聚光器对中旋钮; (14) 汞灯荧光光源;
(6)孔径光阑; (15) PFS 控制器
(7)聚光器模块(包括明视场,DIC); (16) HUB 控制器
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遥控器示意图(根据具体配置有些图标可能不显示)
1) 物镜切换按钮;
2) 滤光块,DIC 检偏器切换按钮;
3) DIC 检偏器快速切换按钮;
4) 光路端口切换按钮;
5) PFS 开关控制按钮;
6) 聚光器转盘切换按钮;
7) 透射光源控制按钮*。
*请注意:CNTL 按钮灯亮,则可以通过遥控器或电脑控制软件来调节透射光源强度,此时显微
镜底座左侧光源开关和调节旋钮锁定;CNTL 功能关闭,可以通过显微镜底座开关和旋钮来控制
透射光源。
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前面板示意图
1) 状态显示屏;
2) PFS 开关按钮和 PFS 聚焦状态指示灯(需要选购 PFS 部件);
3) 光路端口切换按钮;
4) 中间变倍旋纽;
侧面板示意图
1) 调焦旋钮
2) 粗微调切换按钮
3) 物镜切换按钮;
4) 滤光块,DIC 检偏器切换按钮
5) 透射光光源开关(当遥控器透射光源控制按钮打开时,此按钮无效);
6) 透射光量度调节旋钮(当遥控器透射光源控制按钮打开时,此旋按钮无效);
7) 物镜复位;
8) 物镜向下移动 2 毫米;
注意:在使用显微镜之前,要把主机底座右后端的黑色 HUB 控制器(显微镜示意图 15 位置)
右侧的电源开关打开。
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(二) 明视场透射光操作要点
1) 打开电源开关,并打开显微镜透射光卤素灯电源开关;
2) 把滤色块移到空位;
3) 把起偏器,检偏器移出光路;
4) 把聚光器转盘切换到 A 状态;
5) 检查柯勒照明(柯勒照明调节方法参看附录 1);
6) 检查出光端口。
(三) 微分干涉(DIC)操作要点
1) 按照明视场透射光观察方法调节好显微镜;
2) 把起偏器,检偏器移入光路;
3) 按照相对应物镜将聚光器镜转盘转到相应 N1/N2 位置(请参见另外所附对照表);
4) 检查出光端口;
5) 旋转起偏器,选择最佳显示效果。
(四) 荧光观察操作要点
1) 打开荧光电源稍待片刻至光源指示灯不闪;(打开约 10min 稳定,关闭需要超过 15min
后才可以再次启动)
2) 确认透射光开关处于关闭状态;
3) 检查出光端口;
4) 选择合适的滤色块;
5) 打开光闸(汞灯面板的 shutter 旋钮),调节荧光亮度(汞灯面板的 ND 旋钮),进行观察;
6) 不观察时,把光闸关掉,以避免荧光淬灭。
注意:该系统配置透射和荧光光闸,在做相应操作时,应将对应光闸打开。光闸开关可在遥
控器上设定。
落射光照明
光闸按钮
透射光光闸
按钮
汞灯光闸按钮
(电动型号)
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显微镜光路调节和照明注意事项
(一) 柯勒照明的调节方法
1) 选择 10X 物镜;
2) 调焦,使标本清晰成像;
3) 缩小视场光阑(显微镜视图 2 位置);
4) 上下调节聚光器(显微镜视图 3 位置),使视场光阑边缘清晰;
5) 调
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