基因组文库和cDNA文库的比较（方案）.ppt

基因组文库 概念 文库制备 02 概念 cDNA文库：以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。 公式:N=ln（1-P）/ln（1-f） 02 文库构建 细胞总RNA的制备及mRNA的分离 包括mRNA、tRNA、rRNA cDNA第一条链的合成 oligo引导合成法、随机引物引导合成法 双链cDNA的合成 四种常用方法 cDNA与载体的连接和噬菌体颗粒的包装及转染或质粒的转化 02 文库构建 引导合成第一链 oligo 02 文库构建 双链 合成方法 DNA 02 文库构建 大肠杆菌 酶降解取代法 RNaseH 02 文库构建 寡聚引物引导法 Oligo 目录 CONTENTS 目录 CONTENTS 目录 CONTENTS 目录 CONTENTS 标注 字体使用 行距 背景图片出处 声明 英文 Century Gothic 中文 微软雅黑 正文 1.3 本网站所提供的任何信息内容（包括但不限于 PPT 模板、Word 文档、Excel 图表、图片素材等）均受《中华人民共和国著作权法》、《信息网络传播权保护条例》及其他适用的法律法规的保护，未经权利人书面明确授权，信息内容的任何部分(包括图片或图表)不得被全部或部分的复制、传播、销售，否则将承担法律责任。 OfficePLUS 背景图片素材 OfficePLUS 点击Logo获取更多优质模板（放映模式） 基因组文库和cDNA文库的比较 基因组文库 02 cDNA文库 03 两者比较 基因组文库 概念 文库构建（原核） 文库构建（真核） 01 概念 基因组文库：某种生物基因组的全部遗传信息通过克隆载体贮存在一个受体菌的群体中，这个受体菌群体就是该种生物的基因组文库。 公式:N=ln（1-P）/ln（1-f）, 实际克隆子数应为2N~3N或更大。 01 文库构建（原核） 物理学方法：机械类或超声波等 生物化学方法：限制酶部分切割 制备基因组DNA并片段化 重组DNA导入受体菌细胞并扩增 DNA片段与载体重组连接 筛选鉴定基因组文库 原核生物基因组较小，一般采用质粒载体或λ载体。 01 文库构建（真核） a.构建 λ噬菌体型基因组文库 真核生物和原核生物基因组文库构建的原理和过程基本相似，方法有异（原核采用质粒载体或λ载体）。下面介绍三种方法： 01 文库构建（真核） b.构建 Cosmid基因组文库 由于筛选困难、重组效率低、文库不易贮存，Cosmid使用不如λ噬菌体载体普遍。 01 文库构建（真核） c.构建酵母人工染色体型基因组文库 酵母人工染色体 目录 CONTENTS 目录 CONTENTS 目录 CONTENTS 目录 CONTENTS 标注 字体使用 行距 背景图片出处 声明 英文 Century Gothic 中文 微软雅黑 正文 1.3 本网站所提供的任何信息内容（包括但不限于 PPT 模板、Word 文档、Excel 图表、图片素材等）均受《中华人民共和国著作权法》、《信息网络传播权保护条例》及其他适用的法律法规的保护，未经权利人书面明确授权，信息内容的任何部分(包括图片或图表)不得被全部或部分的复制、传播、销售，否则将承担法律责任。 OfficePLUS 背景图片素材 OfficePLUS 点击Logo获取更多优质模板（放映模式）