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TQD 操作手册 2007-12-5 版本号1.1 1/31 日常操作步骤： 准备 UPLC 设置样品表 运行样品 定量 打印报告 注：如果一个星期内不运行样品请不要关质谱仪，使其保持真空。 建立新方法和project 的操作步骤： 准备 UPLC 建立新的 project 用标准品调谐 编辑质谱方法 编辑 UPLC 方法 设置样品表 运行样品 定量 打印报告 1. 开机 1.1. 打开电脑，打开质谱电源和 UPLC 各电源，各部件通过自检后，点击 MassLynx V4.0.lnk 进入工作站。 1.2. 选择 Instrument MS Tune 进入调谐页面。 1.3. 从调谐页面选择 Vacuum pump，打开真空泵，开始抽真空。机械泵和分子涡轮泵开始 工作。 1.4. 质谱上的真空灯开始闪烁，当系统达到真空状态，灯变为绿色，不再闪烁。如果达到 实验状态大约要抽真空 12 小时 1.5. 气源压力设置 氮气：90 – 120 psi 氩气：7 psi 2. 准备 UPLC 系统 2.1. 准备流动相 用 0.22um 的膜过滤缓冲液，所有的缓冲液和超纯水都要新配制，超纯水 和缓冲液使用不得超过二天。 2.2. 所有样品都要用流动相初始梯度比例的溶剂来溶解，并用 0.22um 的膜过滤。 2.3. 初始化 UPLC 泵 在 Masslynx 主页面上选择 出现下面的画面。 2/31 2.4. 点击 进入 UPLC 控制台，见下图。 2.5. 湿灌注 UPLC 泵 选择CONTROLPrime A/B solvent 3/31 2.6. 选择 A1/B1 或 A2/B2 输入时间 1min，如果更换了流动相则输入 3min,按 star. 2.7. 初始化 UPLC 自动进样器 在 UPLC 控制台上选择 Sample Manager 2.8. 选择 Control Prime syringes 4/31 2.9. 灌注进样器和洗针系统。选择 Sample syringe and wash syringes 2.10. 参数 Number of cycles 平时选 1，但在更换洗针溶液时选 5。 2.11. 点击 OK 开始。 2.12. 完成后，UPLC 可以正常的工作。 3. 建立一个新的 Project 如果在已有的 Project 下进行试验，此步可以不做。 3.1. 从Masslynx主窗口选择FileProject Wizard 3.2. 当出现以下窗口时，点击Yes 5/31 3.3. 输入Project Name 3.4. 选择Create using existing project as template,点击Browse选择新建 project 的模版 4. ESI 调谐 调出目标化合物的最佳质谱参数 4.1. 母离子调谐 4.1.1. 从 Masslynx 的主画面选择 ，打开调谐页面。选择离子模式。 4.1.2. 按以下画面在 ES+ source 页面，输入 Desolvation Gas Flow, Desolvation Temp ，Source Temp。 4.1.3. 等去溶剂气和源温度稳定。在ES+ source页面下输入参数。 6/31 4.1.4. 在调谐页面下，设置去溶剂气流量为650L/hr,按“Gas”按扭，打开氮气。 4.1.5. 在质量分析器（Analyser）中选择MS。如下图：并按图中输入其它的参数。 7/31 4.1.6. 打开高压，使质谱进入 Operate 状态。 4.1.7. 在 Masslynx 主画面点击 MS Console 进入 MS 控制台，点击 Interactive Display. 出现以下画面： MS 控制台 8/31 4.1.8. 在 A 瓶中放入需要调谐用的标准溶液(0.2--1ppm 不少于 1ml)，在 Flow State 中选 择“Combined”： 4.1.9. 在 Reservoir 中选择 A，下图中点击 冲洗和置换 A 流路。 4.1.10. 设置 UPLC 的流速（通常为 0.3ml/min）和流动相的比例（通常有机相：水相=50： 50）。 4.1.11. 设置 Infusion Flow Rate 为 5--20ul/min，点击 开始注入调谐液到质谱里。 4.1.12. 在ES+ source页面 Function 下拉菜单中选择 MS scan，输入化合物 M+H（正离子） 的质量数。输入合适的 Cone 等参数，把图中质谱峰的信号调到最强。 9/31 典型的离子源参数设置 Capillary (kV) 0.50 – 3.75 ES + Capillary (kV) 0.50 – 3.0 ES - Co