pcr前处理及核酸提取.doc

VERSA 基因组学及快速移液 工作站产品介绍 实验室自动化解决方案 Aurora 亚洲技术服务中心 主要内容 ?基因组学相关产品介绍 ?快速移液工作站介绍 生物医学的研究基础 ? 研究对象：各种水溶液。无论是蛋白，DNA，还 是细胞，只在水溶液里面才具有生物学活性。 ? 研究方法：各种水溶液混合的次序和组合。让各 种分子，细胞在合适的环境中模拟体内的生物过 程。 ? 研究结果：可通过各种放大系统 让研究者知道反应进行的程度。 ? VERSA的作用：自动化处理液体 液体处理自动化的重要性 工作效率 – 不仅仅是工作速度的提高，更重要的是具备无人值守的工作能 力，节省更多时间和精力给其它事务。 液体处理需求 – 在各个不同的领域中，待测样品的体积和数量差别很大。 生物医药：微升级别 从几个到几千个/天 不等 环境检测：毫升级别 从几个到几百个/天 不等 重复操作 – 将重复性操作实现自动化，实现液体转移可靠性的提高。 减少因重复而疲劳导致的材料损失或伤害事件 操作安全 – 对于生物危险性的样品，避免操作人员的健康风险。 成本控制 – 人工和耗材都得到可控的充分的利用。 总体来说，更能节省运行成本（避免：误操作损失，人力 成本，健康风险，低批量伴随的高成本） VERSA Series 当前液体处理系统存在问题 ? 昂贵 ? 缺乏弹性 ? 多合一系统 ? 空间占用 ? 复杂的软件和附件 ? 操作复杂 VERSA Series VERSA 系列带来的解决方案 ? 成本效用提高 ? 充分的弹性 – 体积大小 – 处理范围 – 整合不同功能模块 ? 正是你所需要的设置： – 能应用于多种用途的多合一机型， 或者专为单一应用量身定制机型。 VERSA Series Applications 基因组（分子生物）学： 生物化学分析化学 – PCR 建立/纯化 – DNA/ RNA 酶切/联接 – 核酸分离纯化 – 测序反应建立 – 引物/基因的合成 – 液液萃取 – 固相萃取 – – 自动进样器 通用液体处理 免疫学/分子诊断 – ELISA（酶免） 点阵/微量液体分配 – 生物试剂生产 – TRFIA（时间分辨） – 蛋白/DNA 低密度芯片 – CLIA（化学发光） – 蛋白结晶学 – 样品前处理 – 固相多肽合成 – 全自动分析系统 VERSA Series VERSA Platfor ms VERSA HT Integration VERSA 1100 VERSA 600 VERSA 110 VERSA 10 VERSA Series 一、VERSA基因组学相关产品介绍 ?常规操作的缺陷 ?VERSA产品功能及实验结果分析 ?目前市场介绍 ?竞争对手比较 ?优势汇总 常规操作的缺陷 ?工作效率 – 工作速度慢，需人工操作，重复劳动，耗时耗力。 ?重复操作 – 简单重复程式化的操作过程，容易因重复而疲劳导致材料 损失，重现性降低。 ?操作安全 – 多种生物危险性的样品，对操作人员有很大的健康风险。 ?成本控制 – 低样本量操作对生化试剂的耗损加大。 对比分析 1.1 Aurora磁珠法提取原理 ? 基于磁珠吸附提取核酸法：磁珠可共价结 合核酸配体，核酸与磁珠的特异性结合使 核酸吸附于磁珠的表面，经过沉淀或洗脱 ，从而获取纯化的核酸。 优势：试剂简单，操作无需离心，不用氯仿 等有毒有机溶剂，提高了实验安全性能，成 本较低，时间短，效果好，且便于自动化。 1.2 磁珠DNA分离过程 标准96磁环， 适配96孔标 准盘 标准24磁棒 吸附盘 1.3Aurora磁珠法基因组DNA提取盒原理 磁珠在特定的条件下可特异性地与核酸结合，而不 与样本中的蛋白、糖类和脂类等杂质结合；然后经过洗涤 和沉淀去除杂质后；再利用洗脱液将结合在磁珠上的核酸 洗脱下来，从而获取高纯度的核酸。 Versa 的基因组学应用 ? 1. 利用磁珠方法提取RNA/DNA ? 2. 往PCR管中分配液体， 建立PCR反应体系 Source Final VERSA Series 1.2.1 真空过柱型原理 ? 基于膜吸附提取核酸法：利用核酸与待吸 附膜的结合作用，用真空过滤的方式将溶 解液中其他杂质与核酸相分离，从而获得 高纯度的核酸溶液。 优势：试剂简单，操作无需离心，不用氯仿 等有毒有机溶剂，提高了实验安全性能，成 本更低，时间短，产量高，能实现自动化。 DNA 纯化（过柱抽真空） 真空盒 （Waste Manifold ） 收集盒 （Collection Manifold） 负压 真空盒 （Waste Manifold） 负压 2、PCR / 酶反应Setup ? 2.1 PCR概念 聚合酶链式反应，简称PCR（Polymerase Chain Reaction