ATP检测技术培训.ppt

器械清洗的目的： – 降低器械上微生物负荷； – 去除器械上的有机物和无机物； – 控制包装区的污染，达到环境标准要求； – 确保灭菌达到无菌保障水平（ SAV ） 10-6 ATP 检测示意图 残留污染物 细菌细胞中 含有 ATP 有机污染物 中含有 ATP ＋ O 2 萤光素酶 荧光素 反应发光 细菌 含 ATP 有机物残留 清洗质量是保证灭菌成功的前提 降低微生物负荷： 去除大多数微生物后，再进行消毒和灭菌， 才能有效的达到消毒灭菌效果； 去除微生物滋生的条件，阻碍残留的微生物 繁殖（有机物、温度 ） 减少热源的产生（革兰氏阴性杆菌灭活后， 细胞壁释放的内毒素） 深度清洁监测中 ATP 生物荧光法更全面 消毒不合格 清洁不合格 培养法：不合格 ATP 法：不合格 ↑ ↑ 培养法：合格 ATP 法：不合格 ↑ 培养法：合格 ATP 法：合格 清洁不合格 消毒合格、清洁合格 有效去除残留的有机物可阻断微生物滋生环境 清洗质量是保证灭菌成功的前提 ? 去除有机物或杂质： – 覆盖在器械上的有机物或无机物，灭菌剂不易 穿透，有效的保护了细菌芽孢的灭活。使用中 脱落在病人的体内（转移其他病人），可引起 脏器粘连和伤口内感染，甚至危及病人生命。 ATP 存在于细胞内 ATP （三磷酸腺苷）存在于动物细胞、细菌细胞、植物细胞中， 同类活细 胞内的含量基本一致； 体细胞 ATP 含量大约为 1 × 10 -15 mol ATP ； 细菌细胞中 ATP 含量大约为 2 × 10 -18 mol ATP ； 细胞在自然凋亡的情况下， ATP 含量会有所变化； 因此可通过 ATP 的残留量，直接反映清洁的效果。 技术原理 ? 沾染在物体表面、医疗器械上的血液、组织液等体液中含有大量的体 细胞和细菌等污染物，这些生物污染可以通过 ATP 生物荧光法测出。 ? 萤光素酶在 Mg 2 ＋ 、 ATP 、 O 2 的参与下进行酶促反应放出光子 ? 仪器定量测定加入 ATP 标准品前后的相对发光值 RLU ，从而获知污染物 中的 ATP 含量，来判断医疗器械的 污染程度和清洗效果 。 ? 通过使用体细胞 ATP 消除技术，也可对残留细菌进行检测 。 ATP 的可重复性实验 ? 以细菌内 ATP 为指示物，取 10 5 大肠埃希菌（ ATCC8099 ）菌悬液 50 μ L ， 加入无菌离心管中进行 ATP 含量测定并用菌落计数法对照 ；上述试验重 复三天，每天同一管菌液重复测十次；将每天测的次数与 ATP 含量之间 的关系进行曲线标定。 菌落总数（ CFU ） 第一天 1.78 × 10 4 第二天 1.23 × 10 4 第三天 1.88 × 10 4 中国 CDC 消毒检测中心 ATP 生物荧光法与细菌计数法的相关性研究 金黄色葡萄球菌（ ATCC6538 ）测定结果： 菌落计数 相对光单位 CFU Log (CFU) RLU Log （ RLU ） 2.79 × 10 8 8.45 4582901 6.66 2.78 × 10 7 7.44 2321700 6.37 2.76 × 10 6 6.44 699931 5.85 2.81 × 10 5 5.45 81096 4.91 2.75 × 10 4 4.44 8160 3.91 2.82 × 10 3 3.45 985 2.99 2.82 × 10 2 2.45 176 2.25 2.75 × 10 1.44 120 2.08 表中 cfu 和 RLU 值均为 5 次试验结果平均值。 中国消毒学杂志 1001-7658 （ 2008 ） 03-0245-04 48 小时 5 秒 y = 1.3199x - 0.8317 R 2 = 0.9778 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 relat