常用ph缓冲溶液的配制和ph值.doc

??（一）溶液配制注意事项 1．药品要有较好的质量??试剂分为优级纯（保证试剂，Guaranteed?reagent，G．R．）、分析试剂（Antalytical?reagent，A．R．）化学纯（Chemical?pure，C．P．）和实验试剂（Laboratory?reagent，L．R．）等等。工业用的化学试剂，杂质较多，只在个别情况下应用，如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。 2．药品称量要精确。 3．配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水，比电阻值在50万欧姆以上，pH在5.5~7.0之间才可应用，在组织培养等特殊用途时应注意此项要求，配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。 ４．配好后的溶液，应立即除菌处理（如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质），以防杂菌生长。 （二）0.067（1/15）Mol/L磷酸缓冲液 1．1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制：称取磷酸二氢钾（KH2PO4，A．R．）9.08g，用蒸馏水溶解后，倾入1?000ml容量瓶内，再稀释至刻度（1?000ml）。 2．１/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制：称取无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，A.R.）9.47g（或者Na2HPO4·2H2O?11.87g）用蒸馏水溶解后，放入1?000ml容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度（1?000ml）。 3．按附表的比例，配制成不同pH值的缓冲溶液。 附表1?磷酸盐缓冲液配制法（单位：毫升） pH?1/15Mol/L?Na2HPO4?1/15Mol/L?KH2PO4?pH?1/15Mol/L?Na2HPO4?1/15Mol/L?KH2PO4? 5.8?8.0?92.0?7.1?66.6?23.4? 5.9?9.9?90.1?7.2?72.0?28.0? 6.0?12.2?87.8?7.3?76.8?23.2? 6.1?15.3?84.7?7.3?80.8?19.2? 6.2?18.6?81.4?7.5?84.1?15.9? 6.3?22.4?77.6?7.6?87.0?13.0? 6.4?26.7?73.3?7.7?89.4?10.6? 6.5?31.8?68.2?7.8?91.5?8.5? 6.6?37.5?62.5?7.9?93.2?6.8? 6.7?43.5?56.5?8.8?94.7?5.3? 6.8?49.6?50.4?8.1?95.8?4.2? 6.9?55.4?44.6?8.2?97.0?3.0? 7.0?61.1?38.9?8.4?98.0?2.0? （三）0.15Mol/L?PB液 附表2??0.15Mol/LPB液配制法 pH?0.15Mol/L?Na2HPO4（ml）?0.15Mol/L?NaH2PO4（ml）? 6.4?26.5?73.5? 6.6?37.5?62.5? 6.8?49.0?51.0? 7.0?61.0?39.0? 7.2?72.0?28.0? 7.4?81.0?19.0? 7.6?87.0?13.0? Na2HPO4·2H2O分子量=175.05???0.15Mol/L溶液含26.7g/L。 Na2HPO4·12H2O分子量=358.22??0.15Mol/L溶液含53.7g/L。 NaH2PO4·H2O分子量=138.00????0.15Mol/L溶液含20.7g/L。 NaH2PO4·2H2O分子量=156.03???0.15Mol/L溶液含23.4g/L。 （四）0.2Mol/L?PB缓冲液 附表3??0.2mol/L?PB缓冲液配制法 pH?0.2?Mol/L?Na2HPO4（ml）?0.2Mol/L?NaH2PO4（ml）? 5.8?8.0?92.0? 6.0?12.3?87.7? 6.2?18.5?81.5? 6.4?26.5?73.5? 6.6?37.5?62.5? 6.8?49.0?51.0? 7.0?61.0?39.0? 7.2?72.0?28.0? 7.4?81.0?19.0? 7.6?87.0?13.0? 7.8?91.5?8.5? 8.0?94.7?5.3? ??? 0.2Mol/L?Na2HPO4·2?H2O溶液35.61g/L ????????????Na2HPO4·12?H2O溶液含71.64g/L ????0.2Mol/LNaH2PO4·H2O溶液含27.60g/L ???????????NaH2PO4·2?H2O溶液含31.21g/L 欲配0.1Mol/L?PB缓冲液则在0.2Mol/L?PB缓冲液的基础上加H2O稀释1倍即可。欲配制PBS液时，则在溶液中加0.85％的NaCl溶液即可。 （五）无钙镁离子磷酸缓冲