乳腺癌her2检测52页文档.ppt

HER-2 检测 : IHC 抗原修复 有 / 无 组织固定 方法 抗体选择 评分标准 变异性 福尔马林固定 / 石蜡包埋组织 HER 基因扩增 2 － 5 倍 （ Southern Hybridization ） Slamon et al, Science 244:712, 1989 ? HER2 “ 阴性” 是由于组织固定后抗原被遮蔽 ? 需要行抗原修复来纠正 Courtesy Michael Press FISH ? 是一种分子细胞遗传学技术，通过荧光标 记的 DNA 探针与细胞核内的 DNA 靶序列杂交。 在荧光显微镜下，于细胞和 ( 或 ) 组织 原位 观察并分析细胞核内杂交于 DNA 靶序列的多 种彩色探针信号，以获得细胞内多条染色 体 ( 或染色体片段 ) 或多种基因状态的信息。 ? “金标准” HER2 gene HER2 gene HER2 gene 双链靶基因 变性的单链 DNA 与荧光标记探针复 性 \ 产生荧光信号 荧光原位杂交法原理 Fluorescence in situ Hybridisation (FISH) HER2 探针 ? 绝大部分是同时含有 HER2 基因 ( 标记为橘红 色荧光 ) 和该基因所在的 17 号染色体着丝粒 ( 标记为绿色荧光 ) 序列的混合探针 ? 经美国 FDA 批准的进口探针 VS 国产探针 Probe for cent. 17 Probe for Her-2/ neu Gene amplification due to multiple copies of chr. 17 (Aneuploidy) True Gene amplification 评价 17 号染色体数目和意义 ? HER2 基因位于 17 号染色体上，大约有 47% 的乳腺癌存在 17 号染色体非整体性 ， 即 17 号染色体不是正常的二体， 而是单体或多体。 ? 绿色探针可以将 17 号染色体的非整体性和单纯的 HER2 基因扩增，尤其是低水平的扩增区分开。 ? 当 HER2 基因与 17 号染色体数目比值大于 2 时，即为 HER2 基因扩增。 ? 加入了这个内对照，就排除了单色探针 ( 探针中仅有 HER2 基因 ) 可能造成的假阴性 (17 号染色体单体 ) 或假阳 性 (17 号染色体多体 ) 。 ? 临床研究显示， 具有这类遗传学特征的患者对治疗的 反应和预后与单纯的基因扩增明显不同。 乳腺癌 HER2 的标准化检测 ? HER2 ，又名 HER2/neu ， c-erbB-2 ，表皮生长 因子受体（ EGFR ）家族成员； ? 原癌基因，位于 17q21 ，编码相对分子量 185KD 的跨膜糖蛋白（跨膜酪氨酸激酶受体， 表皮生长因子样分子），在细胞表面表达； ? 通过参与信号传道通路的一系列活动影响细 胞的增殖与分化。 HER2 基因 信号传导 至细胞核 细胞核 接合部 酪氨酸激酶 活性部分 细胞浆 细胞膜 生长因子（配体） 癌基因活化 细胞分裂 HER2 受体跨膜二聚体的信号传导途径 1 = ? 基因拷贝数 2 = ? mRNA 转录 3 = ? 细胞表面受体蛋白表达 4 = ? 细胞外受体功能域释放 A = HER2 DNA B = HER2 mRNA C = HER2 receptor protein 正常 扩增 / 过度表达 细胞核 细胞质 细胞膜 1 2 3 4 C B A HER2 过度表达：正常状态的 10-100 倍 ? HER2 癌基因的致瘤机制： ? 抑制凋亡，促进增殖；增加肿瘤细胞的侵袭 力；促进肿瘤血管新生和淋巴管新生。 ? 研究表明： ? 30 ％以上的人类肿瘤中存在 HER2 基因的扩增 / 过度表达（如乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜 癌、输卵管癌、胃癌和前列腺癌等 ; ? 20 ％－ 30 ％的原发性浸润性乳腺癌有 HER2 基 因的扩增 / 过度表达 。 HER2 阳性患者的生存期比阴性者缩短一半以上 转移性乳腺癌患者的中位生存期 HER2 阳性 8-10 个月 HER2 阴性 17-22 个月 Slamon DJ et al. Science 1987;235:177 – 82 2019 年发