噬菌体展示技术的原理及应用 课件.ppt

4. 肿瘤药物导航载体： 5. 用肿瘤细胞特殊的受体蛋白从展示文 库中淘选到的多肽或单链抗体，可以作 为抗癌药物的定向输送工具 。一个成功 的实例是：将噬菌体多肽展示库注射入 具有肿瘤的小鼠体内，然后杀死小鼠， 取出肿瘤，再将结合其上的噬菌体洗脱 下来。展示在其上的多肽具有与该肿瘤 的特异性亲和力。将此多肽与细胞毒素 doxorubicin 偶联。结果显示，此偶联物 具有更强的抑制肿瘤的效果 . 5. 酶 ： 例：碱性磷酸酶，蛋白水解酶类， 等等 噬菌体展示技术的原理及应用 (Key words: Phage display) 1 、噬菌体展示技术的原理 2 、噬菌体展示技术的应用现状 3 、噬菌体展示技术应用于水产养殖业 4 、展望 一 、噬菌体展示技术的原理 Lead Hv Link Lv E PIII 融合蛋白 PIII 基因型 表达型 噬菌体展示技术是将 各种多肽或蛋白质以融合 蛋白的形式表达并展示在 噬菌体表面，同时将其遗 传密码包含于噬菌体内部， 这使得蛋白质的功能与其 基因密码有机的连结在一 起。 选择方法： 淘选（ Panning) 而不是 筛选（ Screening) 非展示系统 展示系统 Solid phase selection with immunotubes B B B B B B v v Immunotube coated with antigen coated with steptavidin and biotinylated antigen B biotin antigen Solution phase selection with biotinylated antigen Bind to Streptavidin coated microtitre wells Wash to remove unbound phage particles. Elute bound phage Amplify eluted phage Repeat selection Analyze a) ELISA b) Specificity c) Sequencing d) Affinity e) Activity E.coli 感染 和扩增 ? ? 固相 ? 淘选系统 完整细胞 ? 组织，器官 ? 常规法 ? 淘选方法 正负法 ? 竞争法 ? 噬菌体展示技术最关键的优势有三： ? 第 一 ，淘选 的 高 效 率 使 得 在 极低的 存 在 水平下，挑选到高亲和力噬菌体成为可能； ? 第二，所挑选到的噬菌体可在微量存在的 情况下，通过感染细菌得到富集； ? 第三：展示的多肽或蛋白质与其包含在噬 菌体内部的基因密码的连接，使得结合肽 或蛋白质的序列分析既快速又简便。 ? ? 噬菌体（ M13, T7, T4, ? ) ? 病毒（反转录病毒，杆状病 毒） ? 表面展示系统 细菌（葡萄球菌， E. Coli) ? 酵母 ? 体外共价连接（蛋白 — DNA, ? 蛋白 — RNA) ?