第十三章 动物细胞培养的基本原理和方法.pptVIP

第十三章动物细胞培养的基本原理和方法 1 动物细胞的特点 无细胞壁 倍增时间长，生长缓慢 需氧量少，对搅拌敏感 聚集体形成 原代细胞培养50代即开始退化 3 生长特性 贴附生长型 如神经细胞 悬浮生长型细胞 如血液白细胞，淋巴组织细胞等 4. 体外培养条件 温度，37度 pH：7.2-7.4 气体，氧，二氧化碳，氮气 营养条件 需要多种氨基酸，维生素，辅酶，核酸，嘌呤，嘧啶，激素和生长因子，其中多种成分可以由血清提供 5.动物细胞培养方式 一种是群体培养，将含有一定数量细胞的悬液置于培养瓶中，让细胞贴壁生长，汇合后形成均匀的单细胞层； 另一种是克隆培养，将高度稀释的游离细胞悬液加入培养瓶中，各个细胞贴壁后，彼此距离较远，经过生长增殖每一个细胞形成一个细胞集落，称为克隆（clone）。 　　 思考题1 动物细胞的特点2 动物细胞体外培养的条件3 名词解释 群体培养 克隆培养 * * 2 动物细胞培养定义 动物细胞与组织培养是从动物体内取出细胞或者组织，模拟体内的生理环境，在无菌、适温和丰富的营养条件下，使离体细胞或者组织生存、生长并维持结构和功能的一门技术。 1.温度 温度过低细胞生长缓慢甚至不生长，过高导致细胞死亡。这主要是由酶和蛋白质所需的最适温度决定的。 2.pH 过酸过碱导致细胞死亡。这主要与蛋白质的变性和细胞膜的结构有关。 3.渗透压 细胞内外可溶于水的物质比例和种类决定细胞的膨胀与收缩程度。当某一种极溶于水的物质在细胞外浓度过大时，有可能导致细胞干瘪死亡。 4.营养物 和水一起，又叫细胞培养液。培养液中含有细胞增殖或生长所需各种物质。营养物质包括：N源、C源，这些物质与能量提供有关；无机盐、维生素、激素。 5.水 水是细胞需要数量最大的物质。 6.无菌条件 体外细胞培养仅仅是对所需的细胞进行培养，但环境(如空气)中有各种其它微生物，必须对所需细胞进行无杂菌的隔离培养。