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KOD DNA Polymerase Code No ：GK1101-250U Storage：-20 ℃ 产品组成 规格 KOD DNA Polymerase 0.1 ml250U (2.5U/ ）μl dNTPs 0.1 ml （10 mM ） MgCl 2 1ml （20mM ） 10 ×PCR buffer 1 1ml 10 ×PCR buffer 2 1ml 概述： 本酶是从鹿儿岛县小宝岛的含硫气孔中分离出来的超嗜热原始菌 Thermococcus kodakaraensis KOD1 来源的 KOD DNA polymerase 。具有很强的 3 →5核酸外切酶活性 (校正活性 ) ，保真性约为 Taq DNA Polymerase 的 50 倍。 活性定义： 75℃活性测定条件下，在 30min 内摄入 10nmoles 的 dNTPs 使成为酸性不溶物时所需要酶的活性定义 为 1U。 用途： PCR，尤其用于 PCR 产物的克隆 DNA 片段的平滑化 特点： 具有强有力的 3—5核酸外切酶活性，比 Taq DNA Polymerase 准确性高 50 倍，是 PCR 克隆的最佳选 择。 快捷的 DNA 合成速度，扩增延伸速度为 1Kb/30 秒 (约为 Taq 的 2 倍) ！ 优良的耐热性，对处理 GC-rich 模板等具有特异性高级结构的目的片段非常有利。同时可加入终浓度 2-5% 的 DMSO ，有利于改善扩增效果。 基本反应条件 成分 量 循环（ 1 ） 循环（ 2 ） 循环（ 3） KOD DNA Polymerase 2.5 U 98℃ 1min 98 ℃ 1min 98℃ 1min 10 ×PCR buffer 1 5 μl 98℃ 15s 98 ℃ 15s 98 ℃ 15s 1-50 ng （质粒） Tm 5s Tm 30s 68 ℃ 40s/kb 模板 10-1000ng （基因组） 74℃ 30s/1kb 74 ℃ 30s/kb 引物（ 10uM ） 1 μl 25-35cycles 25-35cycles 25-35cycles dNTPs 0.2 mM Total 50 μl 一般情况下使用 buffer1 ，片段大于 4kb 或者扩增拖带时建议使用 buffer2 。 该酶不适合于长距离 PCR 。长距离 PCR 扩增时建议使用我公司 KOD Dash 。 2+ 所配 buffer 中已含有 12mM Mg 。 如果在循环（ 1 ）条件无法扩增，可使用循环（ 2 ）条件，如果发现有拖尾效应时，可使用循环（