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光学显微镜技术 光学显微镜技术 1、常用组织切片标本制备技术 石蜡切片术 ①取材和固定 ②脱水、透明和包埋 ③切片和染色 ④封固 其他；火棉胶包埋, 冰冻切片, 涂片,铺片,磨片等 石蜡切片术 常用染色方法：HE染色 苏木精 伊红 （Hematoxylin ） （Eosin） 碱性染料 酸性染料 细胞核中的染色质、 细胞质 细胞质中的核糖体 细胞间质成份 染成蓝色 染成红色 HE染色 （嗜碱性） （嗜酸性） 组织结构的嗜色性 嗜酸性： 嗜酸性 嗜碱性： 中 性：一 嗜碱性 其它染色方法 嗜铬细胞 神经原纤维 肥大细胞 A 嗜银性 B 嗜铬性 C 异染性 涂片 铺片 牙 磨片 普通光学显微镜 （light microscope ，LM ） 观察组织细胞微细结构最常用工具 光学部分 起放大作用 分为 分辨率约为0.2µm 放大1500倍左右 机械部分 几种特殊显微镜术 （1）相差显微镜 用于观察生活细胞和末经染色细胞的 形态结构。 神干细胞培养 (2)荧光显微镜 用以观察细胞、组织内荧光物质 的分布。 神经球 共焦激光扫描显微镜 (confocal laser scanning microscope，CLSM) 由四部份构成 激光光源、 共焦成像扫描系统、 电子光学系统、 图象分析系统 可对样品进行断层扫描 重建三维图像。 CLSM又称细胞CT。 CLSM CLSM 图像 CLSM 海马MR、GR共存 Human neuronal precursor cells