双水相萃取法分离纯化白芸豆中.pdf

药物 生 物 技 术 水相萃取法分离纯化白芸豆中 淀粉酶抑制剂的研究 中国药科大学 生命科学与技术学院 江苏 南京 摘 要 采用 双水相系统萃取 淀粉酶抑制剂 考察了 浓度、 浓度和 溶液浓度对 淀粉酶抑制剂分配系数、相比和活力回收率的影响。确定了白芸豆中 淀粉酶抑制剂提取 的最佳条件 即 质量分数为 的质量分数为 质量分数为 时 分配 系数、相比和活力回收率分别为 。 关键词 双水相萃取 淀粉酶抑制剂 分离纯化 中图分类号 文献标识码 文章编号 文章编号 自从上世纪 年代 首先从豆类中 进行 初步的纯化后 为了尽量保持 提取 淀粉酶抑制剂 的生物活性而得到有效的 是一种非 以来 人们对不同来源的 的提取工艺、结 常可靠的生物大分子的纯化方法 其应用前景 构、以及 化性质做了大量的研究工作 。 广阔。 广泛存在于植物尤其是麦类和豆类植物的种子中。 材料和方法 白芸豆中的 是一种热稳定的糖蛋白 在细胞 内质网上合成 储存在液泡内 要经过蛋白水解酶 水解作用才能成为有活性的 。与其它种类 白芸豆 购自本地超市 淀粉酶 的 相比 白芸豆中的 具有较高的比活 美国 公司 可溶性淀粉 分析纯 国 集 力 可以抑制哺乳动物唾液淀粉酶、胰淀粉酶以 团化学试剂有限公司 聚乙二醇 分析纯 广东汕 及昆虫体内 淀粉酶的活性 但不能抑制植物、真 头市西陇化工厂 分析纯 南京化学 菌和细菌 淀粉酶的活性。可以用来治疗糖尿 试剂一厂 其它试剂均为分析纯。 病、减肥以及干扰内源性甘油三脂的合成 还 型大容量离心机 美国 可以用作杀虫剂。 公司 型紫外光栅分光光度计 上海 近年来 对双水相萃取 第三分析仪器厂 。 的研究日益增多。双水相体系 含水量可达 以上 萃取环境温和 生物大分子 蛋白质浓度测定采用考马 在萃取过程中可保持其活性及构象 两相之间的传 斯亮蓝 结合法。 淀粉酶抑制活性的检测采 质和平衡速度快 分相时间短 萃取过程采用常温 用碘比色法。 常压操作 设备要求低 易于放大和进行连续性操 碘比色法 取一定量的 淀粉酶和 于 作。双水相萃取法已经渐渐发展成为一种适合于 磷酸缓冲液中 在 条件下预反应 大规模生产、经济简便、快速高效的分离纯化技术 后 加入 的 的淀粉溶液再反应 现已广泛应用于生物化学、细胞生物学和生物化工 用 的 酸中止反应 等领域的产品尤其是蛋白质、酶、核酸等生物大分 蒸馏水稀释反应液 加 子的分离和纯化。 的碘液显色 在 处测定吸光度值。