第八章6操作方法.pdf

第六节 离子交换操作方法 第八章 第一节 第二节 第三节 第四节 第五节 第六节 第七节 第八节 第九节 一、 树脂的选择 目的物是弱酸性或弱碱性的小分子物质时， 宜选用强酸强碱树脂 （氨基酸的分离）。 蛋白质、酶和其它生物大分子的分离多采用 弱碱或弱酸性树脂，减少生物大分子的变性， 利于洗脱，提高选择性。 2 第八章 第一节 第二节 第三节 第四节 第五节 第六节 第七节 第八节 第九节 二、树脂的处理和再生 1、 外观特征 透明或半透明；颗粒圆整，粒度均匀，强度。 2、 树脂的预处理 （1） 物理处理：去杂，过筛。 （2） 化学处理：用8～10倍的1mol/L 盐 酸或氢氧化钠溶液交替浸泡。 3 第八章 第一节 第二节 第三节 第四节 第五节 第六节 第七节 第八节 第九节 氨基酸分离前树脂的处理 （强酸型阳离子） 4 第八章 第一节 第二节 第三节 第四节 第五节 第六节 第七节 第八节 第九节 不同类型树脂的处理 5 第八章 第一节 第二节 第三节 第四节 第五节 第六节 第七节 第八节 第九节 树脂的再生 树脂再生：使用过的树脂重新获得使用性能的处理 过程。 再生过程： （1） 去杂，大量水冲洗，除去物理吸附的杂质。 （2 ） 用酸、碱处理除去与功能基团结合的杂质。 (3) 转型： 6 第八章 第一节 第二节 第三节 第四节 第五节 第六节 第七节 第八节 第九节 三、基本操作方法 交换：静态交换 动态交换 洗脱方式：分静态洗脱及动态洗脱两种，pH 及离子强度改变。 洗脱液：酸、碱、盐。 7 第八章 第一节 第二节 第三节 第四节 第五节 第六节 第七节 第八节 第九节 酸、碱洗脱液 目的是改变吸附物的电荷或改 变树脂活性基团的解离状态，以消除静电结 合力，迫使目的物被释放出来； 盐类洗脱液是通过高浓度的同种电荷的离子 与目的物竞争树脂上的活性基团，使吸附物 游离。 8 第八章 第一节 第二节 第三节 第四节 第五节 第六节 第七节 第八节 第九节 洗脱方式 动态洗脱： 1、 溶液pH及离子强度不变。 2、分阶段改变溶液pH及离子强度。 3 、连续改变溶液pH及离子强度。 梯度洗脱：自动化的梯度仪 9 第八章 第一节 第二节 第三节 第四节 第五节 第六节 第七节 第八节 第九节 梯度洗脱 梯度混合器: A瓶为低浓度盐溶液 B瓶为高浓度盐溶液 C=C ― （C ―C ）VAA/AB A A B