生物制药工艺学简介.pdf

第十二章 制备型高效液相色谱 制备型高效液相色谱 第十二章 第一节 第二节 第三节 第四节 在生物制药中的应用 • 基因工程药物: 白细胞介素、胰岛素。 • 天然产物: 蛋白质,多肽,多糖。 第十二章 第一节 第二节 第三节 第四节 第一节 高效液相色谱法简介 第十二章 第一节 第二节 第三节 第四节 液相色谱的发展史 • 1903年，色谱法问世 俄国植物学家茨维特 1903年3月21日，大会报告 “一种新型吸附现象及其在生化分析上的应用” 1906年在德国植物学杂志发表文章，首次命名上 述分离后色带为色谱图，称此方法为色谱法 • 1931年，库恩（Kuhn）分离胡萝卜素，1938年， Kuhn和Lederer从维生素B中分离出B6，获得了 1938年的诺贝尔化学奖。 • 1941年，马丁（Martin）和辛格（Synge）提出 液液分配色谱法，1952年度的诺贝尔奖。 • 60年代末，70年代初，高效液相色谱仪的成功研 制 第十二章 第一节 第二节 第三节 第四节 1.2 基本仪器装置 • 输液系统 • 进样系统 • 分离系统 • 检测系统 • 数据处理系统 第十二章 第一节 第二节 第三节 第四节 第十二章 2 1 高效液相色谱仪组成 高压输液泵 1 输液系统 在线脱气装置 (1) 高压输液泵 作用：将流动相以稳定的流速或压力输送到色谱系统。 输液泵的稳定性直接关系到分析结果的重复性和准确性。 第十二章 (1) 高压输液泵 第十二章 (2)在线脱气装置 作用：脱去流动相中的溶解气体。流动相先经过脱气 装置再输送到色谱柱。 在线脱气、超声脱气、真空脱气等 脱气不好时有气泡，导致流动相流速不稳定，造成 基线飘移，噪音增加。 Pressure Dampers O , N , 2 2 CO … 2 第十二章 （3 ）梯度洗脱装置 Isocratic elution 恒定组成的单一溶剂体系 Gradient elution 以一定速度改变多种溶剂的配比淋洗， 目的是分离多组容量因子相差较大的组分 High-Pressure Mixing 第十二章 2 进样系统 六通阀 第十二章 3 色谱柱 Normal column 5-μm、4.6- μm Narrow bore column 1-3 μm Micro column 1 μm 色谱柱是实现分离的核心部件。要求柱效高、 柱容量大和性能稳定。柱性能与柱结构、填料特性、 填充质量和使用条件有关。 第十二章 色谱柱填料 基质：载体或担体。数μm~数