结核病实验室诊断201609.pptxVIP

结核病实验室诊断检 验 科 任 易 1. 结核病背景资料 2. 结核病常规检验 3. 结核病实验室诊断 4.体外r-干扰素释放试验 5.小 结背景—结核病流行现状全球有三分之一人口（20亿）感染了结核杆菌我国现患肺结核病人达500万，占全球病人总数的1/4背景—结核病感染、传播、发病过程播散Disseminates诊断Diagnosis康复Recovery发作Onset治疗Treatment痊愈细菌在人体复制潜伏感染染肺病或其他疾病 潜伏感染复发 ≥ 2 个月（months）时间表Time背景—当前结核病的研究新型抗结核药物(50%)新型快速诊断技术(40%)新型结核疫苗(10%)JID 2012:205 (Suppl 2), S147.背景—结核分枝杆菌基础结核分枝杆菌（M. tuberculosis）简称为结核杆菌（tubercle bacilli）。早在1882年，德国细菌学家柯赫（Robert Koch）就已证明结核分枝杆菌是结核病的病原菌。本菌可侵犯全身各组织器官，但以肺部感染最多见。在微生物分类中，结核分枝杆菌属于放线菌门、放线菌纲、放线菌目、分枝杆菌科、分枝杆菌属分枝杆菌复合群共包括人型、牛型、非洲型和田鼠型，而人型结核分枝杆菌是人类主要的致病菌背景—结核分枝杆菌基础（1）结核杆菌可经多途径感染，由呼吸道、消化道和破损皮肤侵入机体，最常见为经呼吸道感染引起肺结核。 （2）结核杆菌无内毒素和外毒素，也不产生侵袭性酶，其致病性主要与其细胞壁内含大量脂质有关。主要包括： ①磷脂：可刺激单核细胞增生，与结核结节和干酪样坏死形成有关 ②分枝菌酸：与抗酸染色性有关 ③索状因子：可破坏细胞线粒体膜，与慢性肉芽肿形成有关 ④硫酸脑苷酯：抑制吞噬溶酶体形成，具有抗吞噬作用 ⑤ 蜡质D，可刺激机体的迟发型超敏反应。 （3）结核杆菌主要引起细胞免疫反应，属于传染性免疫结核病患者的常规检验三大常规（血常规、尿常规、大便常规）血沉血流变检测肺结核患者血液粘滞性、凝固性、聚集性均增高，血流缓慢，易于促成肺内微血栓形成 ——《微循环学杂志》 常规检测，无特异性。结核病患者的常规检验腺苷脱氨酶（ADA）:其血清/浆膜腔积液比值更有意义。C反应蛋白 （CRP）: X线提示有空洞的结核病人比没有空洞的结核病人以及健康人显著升高。但是CRP正常不能排除结核病。 ——Infection.17(1):13-4,1989 Jan-Feb辅助治疗检测：肝功能、肾功能、血脂、血糖。。。。NSE 、AFU等指标用于鉴别诊断。CA 125标志的使用，可以作为结核病疗效判断指标。结核病与肺部肿瘤患者均升高。 ——《中国实用内科杂志》2003年 第2期结核病患者的常规检验超敏C反应蛋白：肺结核是结核分枝杆菌感染导致机体细胞免疫功能下降的慢性呼吸道传染病，患者血清中HS—CRP、免疫球蛋白、补体可发生改变。 ——《中国实验诊断学》 2009年01期降钙素原（PCT）肺结核患者血清PCT水平明显低于社区获得性肺炎（CAP）患者，HIV阴性的肺结核患者血清PCT水平并不会明显增高，故可用于PTB和CAP的鉴别诊断，但当PCT水平大于正常值时，其预后价值较差。可作为肺结核和肺结核伴感染诊断的辅助指标。 ——[Eur?Respir?J?2011;?37(2):371]结核病实验室诊断技术简介分子生物学免疫学细菌学其 他1.涂片2.培养3.药敏4.菌型鉴定1.结核抗体2.结核蛋白芯片3.体外r-干扰素试验4.结核杆菌分泌抗原1.实时荧光定量PCR2.DNA3.RNA4.耐药基因突变5.菌型鉴定6.测序1.HPLC2.质谱技术3.流式技术涂片镜检染色结核分枝杆菌形态学检测1.直接抹片法2.离心制片法1.抗酸染色2.荧光染色1.普通显微镜2.荧光显微镜3.自动阅片技术结核杆菌离心制片技术2015年7月至2015年11月，对本院257例痰液和纤维支气管镜灌洗液进行直接涂片法和离心制片法比对验证试验，结果如下：直接涂片法离心制片法合 计阳 性阴 性阳性41041(15.9%)阴84.1%)合计58（22.6%）199(77.4%)257结论：离心制片法的确能提高结核杆菌涂片检测的阳性率。结核杆菌自动阅片技术2016年2月至2016年3月，本院对308例涂片进行人工阅片和计算机自动阅片比对试验；结果符合的为286例，总符合率为92.58%。结核分枝杆菌体外药敏试验结核杆菌体外药敏试验MIC测定法固 体培养法液体仪器法液体微量法结核分枝杆菌体外药敏试验 Drug free Isoniazid Ethambutol Inoculum media 0.2 mcg/ml 2.0 mcg/ml 10-3++++ ++