K205 农产品理化分析技术 W3605乳粉中蛋白质含量的测定 W3605乳粉中蛋白质含量的测定-2-微课件.pptx

蛋白质和氨基酸的测定 主讲教师：江苏农林职业技术学院 李静 农产品/食品理化分析技术 目录页 CONTENTS PAGE 过渡页 TRANSITION PAGE 一、目的与要求 乳粉中蛋白质含量的测定 1.目的与要求 2. 原理 3. 试剂与器材 4. 操作要点 5. 结果分析 6. 注意事项 7. 思考与讨论 二、原理 乳粉中蛋白质含量的测定 样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出，而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。 将消化好的样品加碱蒸馏，使氨蒸出。用硼酸吸收后，再用标准酸溶液滴定。 用硼酸溶液吸收氨气。 再用标准酸溶液滴定,根据酸的消耗量计算。 1.目的与要求 2. 原理 3. 试剂与器材 4. 操作要点 5. 结果分析 6. 注意事项 7. 思考与讨论 三、试剂与器材 乳粉中蛋白质含量的测定 1.目的与要求 2. 原理 3. 试剂与器材 4. 操作要点 5. 结果分析 6. 注意事项 7. 思考与讨论 四、操作要点 乳粉中蛋白质含量的测定 1.取样 于干燥洁净的消化管内 1.目的与要求 2. 原理 3. 试剂与器材 4. 操作要点 5. 结果分析 6. 注意事项 7. 思考与讨论 四、操作要点 乳粉中蛋白质含量的测定 2.消化 将消化管放入消化炉，先采用低温加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，提高消化温度，保持消化管内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热0.5h~1h，取下放冷。同时做试剂空白试验。 1、加入称量好的乳粉样品 2、加入1勺催化剂（CuSO4与K2SO4的混合物，1:20） 3、加入20mL浓硫酸 1.目的与要求 2. 原理 3. 试剂与器材 4. 操作要点 5. 结果分析 6. 注意事项 7. 思考与讨论 四、操作要点 乳粉中蛋白质含量的测定 3. 蒸 馏 与 吸 收 碱液 硼酸 消化好的样品加水稀释 接收瓶内加入硼酸 碱液加入消化管 开始蒸馏 氨被蒸出 循环水冷凝 氨被吸收 1.目的与要求 2. 原理 3. 试剂与器材 4. 操作要点 5. 结果分析 6. 注意事项 7. 思考与讨论 四、操作要点 乳粉中蛋白质含量的测定 4.滴定 1.目的与要求 2. 原理 3. 试剂与器材 4. 操作要点 5. 结果分析 6. 注意事项 7. 思考与讨论 五、结果分析 乳粉中蛋白质含量的测定 1.目的与要求 2. 原理 3. 试剂与器材 4. 操作要点 5. 结果分析 6. 注意事项 7. 思考与讨论 1. 数据记录 项目 第一次 第二次 第三次 平均值 空白滴定消耗盐酸标准溶液（mL）       样品滴定消耗盐酸标准溶液（mL）       表1 数据记录表 五、结果分析 乳粉中蛋白质含量的测定 X——样品蛋白质含量，g/100g； V1——样品滴定消耗标准HCl溶液的体积，mL； V2——空白滴定消耗标准HCl溶液的体积，mL； C——标准HCl滴定溶液的浓度，mol/L； 0.014——1mL盐酸[c(HCl)=1.000 mol/L]标准滴定液相当于氮的质量，g； m——样品的质量，g； F——氮换算为蛋白质的系数。 1.目的与要求 2. 原理 3. 试剂与器材 4. 操作要点 5. 结果分析 6. 注意事项 7. 思考与讨论 2. 结果计算 六、注意事项 乳粉中蛋白质含量的测定 1、取样量较大时，消化时每克试样增加5ml H2SO4的量； 2、蒸馏前若加碱量不足，消化液不生成Cu(OH)2沉淀，增加碱用量； 3、消化时，若样品含糖高或含脂及较多时，注意控制加热温度，以免大量泡沫喷出凯氏烧瓶，造成样品损失。可加入少量辛醇或液体石蜡，或硅消泡剂减少泡沫产生； 4、硼酸吸收液的温度不应超过40℃，否则对氨的吸收作用减弱，造成检测结果偏低。可把接收瓶置于冷水浴中。 常量凯氏定氮法测定蛋白质含量时需要说明的问题及注意事项如下： 1.目的与要求 2. 原理 3. 试剂与器材 4. 操作要点 5. 结果分析 6. 注意事项 7. 思考与讨论 七、思考与讨论 乳粉中蛋白质含量的测定 1．蒸馏时为什么要加入氢氧化钠溶液？加入量对测定结果有何影响？ 2．在蒸汽发生瓶水中、加甲基红指示剂数滴及数毫升硫酸的作用是什么？若在蒸馏过程中才发现蒸汽发生瓶中的水变为黄色，马上补加硫酸行吗？ 3．实验操作过程中，影响测定准确性的因素有哪些？ 1.目的与要求 2. 原理 3. 试剂与器材 4. 操作要点 5. 结果分析 6. 注意事项 7. 思考与讨论